Caracterización de la interacción de las proteínas TGBp1 de virus de la familia Flexiviridae con la proteína de membrana Remorina

M. BINAGHI; F. PUCCIO, A. PERRAKI, MENTABERRY, S. GERMAN S., S. MONGRAND Y A. M. ZELADA

Buenos Aires

Congreso; X Congreso Nacional de Virología; 2011

Sociedad Argentina de Virología

Caracterización de la interacción de las proteínas TGBp1 de virus de la familia Flexiviridae con la proteína de membrana Remorina M. Binaghi1; F. Puccio1, A. Perraki2, Mentaberry, S1. German S.3, S. Mongrand2 y A. M. Zelada1 Facultad de Ciencias Exactas y Naturales - UBA - INGEBI - CONICET. Ciudad Universitaria, Buenos Aires, Argentina. 2Laboratorio de Biogenésis de Membranas, CNRS- Universidad de Bordeaux, Francia. E-mail: binaghi@dna.uba.ar. El Potato virus X (PVX) es un virus a ARN, cuyo genoma codifica una replicasa viral, tres proteínas de movimiento (TGBp1, TGBp2 y TGBp3) y la cápside viral. La proteína TGBp1 es fosforilada por una quinasa celular del tipo CK2 y posee, entre otras funciones, la capacidad de promover el movimiento viral célula a célula. La proteína Remorina (REM) es una proteína específica de plantas vasculares que se localiza en "lipid rafts" y en plasmodesmos y es capaz de impedir la movilización célula a célula de PVX mediante la interacción con TGBp1. El objetivo de este trabajo es caracterizar la interacción entre la proteína TGBp1 de PVX y la proteína REM de N. tabacum y N. benthamiana para establecer su posible función en la movilización viral. Para ello se estudió por ensayos de doble híbrido y ?pull-down? los dominios de interacción de TGBp1. Se observó que tanto el dominio C-terminal como el dominio N-terminal de TGBp1 de PVX tienen la capacidad de interactuar con la REM de N. benthamiana. Por otro lado, se demostró que la interacción entre ambas proteínas no se encuentra regulada por la fosforilación de la proteína TGBp1, dado que las versiones mutagenizadas de TGBp1 en los que los residuos fosforilables no muestran diferencias en su capacidad de interacción con REM. Finalmente, para determinar si esta interacción se encuentran conservados en otros virus filamentosos pertenecientes a la familia Flexiviridae, se estudió la interacción entre REM de N. tabacum y N. benthamiana con otras TGBp1s pertenecientes a los géneros Allexivirus y Carlavirus. Al igual que la TGBp1 de PVX, se observó que las otras TGBp1s son capaces de interactuar con las proteínas REM de ambas especies de plantas. En base a estas observaciones postulamos que la interacción de la proteína TGBp1 de PVX no está restringida a una región particular de la proteína TGBp1 y que dicha interacción no se encuentra regulada por la fosforilación de TGBp1. Por otro lado, podemos inferir que la interacción con REM se encuentra conservada dentro de virus filamentosos pertenecientes a los géneros Allexvirus y Carlavirus, por lo cual será interesante estudiar el efecto de REM sobre la movilización de estos virus.