INVESTIGADORES
VOJNOV Adrian Alberto
congresos y reuniones científicas
Título:
NEOKIT-COVID19, A COLORIMETRIC REVERSE-TRANSCRIPTION LOOP-MEDIATED ISOTHERMAL AMPLIFICATION TEST TO DETECT SARS-COV-2 AND ITS VARIANTS FROM EXTRACTION-FREE SAMPLES
Autor/es:
VOJNOV, ADRIAN ALBERTO
Lugar:
CAPITAL FEDERAL
Reunión:
Conferencia; La biotecnología como solución a desafios pasados, presentes y futuros; 2021
Institución organizadora:
REDBIO
Resumen:
La Tecnología de amplificación isotérmica LAMP para el diagnóstico deenfermedades de importancia agronómica y salud humana se introdujo en ellaboratorio en el año 2008, teniendo como objetivo desarrollar kits molecularesmuy simples para ser utilizados para el diagnóstico de enfermedades queabarquen distintas áreas de importancia tanto agronómicas como en saludREDBIO 202142humana. Los primeros desarrollos estuvieron enfocados en la detección delagente causal de la cancrosis y Huanglongbing de los cítricos, Xanthomonas citriy Candidatus Liberibacter, respectivamente. Un kit, basado en esta tecnologíapara la detección de Chagas en recién nacidos ya ha sido aprobado por el enteregulador, la Administración Nacional de Medicamentos, Alimentos y TecnologíaMédica (ANMAT). El método de detección de COVID-19 desarrollado, se basa enIa retrotranscripción del genoma del SARS-CoV-2 (ARN) seguida de unaamplificación molecular específica de cuatro fragmentos del ADN resultante, apartir del ARN aislado de Ia muestra clinica (hisopado nasofaringeo I orofaringeo,saliva o esputo). La síntesis de un ADNc (retrotranscripción) seguida deamplificación específica del fragmento (amplificación molecular isotérmica) ocurrea temperatura constante (64°C), en un único paso operativo. El resultado se revelaa través de un simple cambio de color. En Ia mezcla de reacción se encuentrapresente el Azuldehidroxinaftol (Hydroxynaphtholblue-HNB), un coloranteindicador que vira de color violeta a color azul-celeste cuando Ia reacción deamplificación es positiva. Dicho viraje, se debe al cambio de concentración delmagnesio libre en solución conforme disminuyen los dNTPs y aumenta elpirofosfato producto de Ia polimerización. El desarrollo fue transferido a NEOKITSAS, una empresa de base tecnológica, constituida por investigadores deCONICET (Adrián Vojnov, Carolina Carrillo, Luciana Larocca, Fabiana Stolowicz),de la Fundación Pablo Cassará (Santiago Werbajh), y el Laboratorio PabloCassará S.R.L. NEOKIT SAS ha logrado desarrollar y registrar en el ANMAT doskits, uno que detecta el COVID-19 a partir de RNA purificado y otro, NEOKITPLUS, de manera directa sin un paso de purificación. Análisis in sílico demuestranque, NEOKIT COVID-19 es capaz de detectar todas las variantes de SARS-CoV-2 que están circulando a nivel mundial, incluidas una variante del Reino Unidoconocida como 501Y.V1, VOC 202012/01 o linaje B.1.1.7, una variantesudafricana conocida como 501Y.V2 o linaje B.1.351, un linaje brasileño varianteconocida como 501Y.V3 o linaje P.1, variantes de California conocidas comoB.1.427 y B.1.429.