Expresión del receptor de endotelinas ETA y sus variantes de splicing en un modelo de hipertensión arterial experimental

MORALES VP; PANE AA; HOPE SI; CATANZARITTI A; GUIL MJ; BIANCIOTTI LG; VATTA MS

CABA

Congreso; REUNION ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE FISIOLOGIA; 2014

SOCIEDAD ARGENTINA DE FISIOLOGIA

Estudios realizados en nuestro laboratorio muestran que las endotelinas (ETs) regulan la transmisión noradrenérgica en diferentes regiones del sistema nervioso central, en muchos casos a través de receptores atípicos o no convencionales. Estos comportamientos atípicos intentan ser explicados por diversas teorías que postulan, la dimerización de receptores (homo y/o heterodimerización), modifcaciones post-traduccionales, la existencia de un tercer receptor en mamíferos y/o la presencia de variantes de splicing las que podrían expresarse diferencialmente de manera temporo-espacial. Recientemente, se reportó la existencia de cuatro de variantes de splicing del receptor ETA de ETs(ETAR) (C13, U8, U3 y L) en pituitaria de rata, de las cuales solo ETAR-C13 tiene similares características a ETAR. Con el objeto de estudiar estos comportamientos atípicos, se decidió analizar las posibles diferencias de expresión de estas variantes de splicing en un modelo animal hipertenso Goldblatt-1. Sobre esta base, el objetivo del presente trabajo consiste en determinar la presencia o ausencia de las distintas variantes de splicing del ETAR en cuatro tejidos Bulbo Olfatorio, Hipotálamo Anterior, Hipotálamo Posterior, Médula Adrenal. Para su determinación se utilizaron técnicas de PCR, PCR en tiempo real y Western Blot. Se observó una trascripción diferencial en las variantes de splicing analizadas cualitativamente por PCR (ETAR-U8, ETAR-U3, ETAR-L), así como las analizadas cuantitativamente por PCR en tiempo real (ETA-WT y ETA-C13). Asimismo, los resultados del análisis de proteinas arrojado por la técnica de Western Blot, nos muestran cambios en los niveles de expresión de proteinas de ETAR, en las bandas a 69 KDa, 48 KDa y 30 KDa. Estos datos, nos permiten concluir que existe una diferencia de expresión, tanto a nivel mensajero, como proteina, para ciertas variantes de splicing de ETAR en el modelo animal hipertenso Goldblatt- 1, existiendo además diferencias tejido específcas.