TNF contribuye con la transformación maligna inducida por RAC3

MILENI SOARES MACHADO; LAURA C. PANELO; FRANCISCO D. ROSA; MARÍA C. LIRA; GABRIELA MARINO; CECILIA V. ALVARADO; ALEJANDRO J. URTREGER; MARÍA F. RUBIO; MÓNICA A. COSTAS

Cdad Autonoma de Buenos Aires

Congreso; XXXIII Jornadas de Oncología; 2018

Instituto de Oncologia "A. H. Roffo"

RAC3 es un coactivador de receptores esteroideos y factores de transcripción, siendo un oncogén importante en el desarrollo tumoral. Trabajos previos de nuestro laboratorio, demostraron que citoquinas inflamatorias aumentan su expresión y que altos niveles de RAC3 pueden transformar células no tumorales cancer stem cells (CSC). El objetivo de este trabajo fue investigar si la citoquina inflamatoria TNF podría contribuir al efecto transformante de RAC3 preservando o aumentando las propiedades stem.Líneas celulares humanas HEK293 (riñón embrionario humano, no tumorales) o sobreexpresando RAC3 (tumorales) y otras líneas celulares tumorales (HeLa y T47D, silenciando o no RAC3) fueron estimuladas con TNF (10 ng/ml) o vehículo y se analizaron propiedades mesenquimáticas, migratorias, invasivas y señales que contribuyen al fenotipo CSC.Observamos que TNF potencia los efectos por sobreexpresión de RAC3, favoreciendo el fenotipo mesenquimático, a través de la disminución de E-cadherina, aumento de Vimentina (ambos por WB) y SNAIL (qPCR) y aumento de la capacidad de migración (ensayo de la herida) y la producción de metaloproteasas (zimografía). Además, en condiciones de alta expresión de RAC3, TNF indujo la translocación nuclear de b-Catenina (lFI) así como la actividad transcripcional de TCF-b-Catenina (ensayo reportero Luciferasa). Todas estas acciones fueron significativamente disminuidas por sulfasalazina, inhibidor de IKK.TNF potencia la acción transformante de RAC3 favoreciendo el fenotipo mesenquimático y cascadas de señal dependientes de NF-kB y b-Catenina, ambas involucradas en la preservación de este fenotipo. Por lo tanto, el microambiente inflamatorio podría contribuir para la iniciación y propagación de tumores, aumentando la expresión de RAC3 y luego potenciando su acción biológica.