La sobreexpresión del coactivador RAC3 favorece el proceso metastásico

LAURA C. PANELO; PABLO N. FERNANDEZ LARROSA; MARÍA F. RUBIO ; CECILIA ALVARADO; MARINA RUIZ GRECCO; MARIA I. DIAZ BESSONE; ALEJANDRO J. URTREGER; MÓNICA A. COSTAS

Mar del Plata

Congreso; 57° Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

Demostramos previamente que el coactivador RAC3 es un oncogén cuya sola sobreexpresión favorece el crecimiento tumoral, la resistencia a apoptosis y tiene un efecto transformante. Sin embargo, poco se sabe sobre el rol de RAC3 en procesos como metástasis y angiogénesis. Por tal motivo el objetivo de este trabajo fue analizar el efecto de RAC3 sobre la migración/invasión celular, la expresión de proteínas involucradas en la transición epiteliomesenquimática (TEM) así como la actividad de metalloproteinasas (MMP). Células HEK293 (no tumorales) transfectadas o no con un vector de expresión para RAC3 y células T47D (tumorales) transfectadas o no con un RNAi para RAC3 fueron seleccionadas para generar clones estables con alto o bajo RAC3. Se realizaron ensayos de migración/invasión en células HEK293 (RAC3 o control) y T47D (RNAi o control) mediante la técnica de Transwell, observándose un aumento del 100% en la migración y 300% en la invasión de células con alto RAC3 vs control, mientras que en células T47D con bajo RAC3 muestran una disminución del 55% de la capacidad invasiva. Estos resultados correlacionan con un aumento del 100% en la actividad MMP2 en células HEK293 (RAC3 vs control) y una disminución del 76% en células T47D (RNAi vs control). Como demostramos previamente la sobreexpresión de RAC3 en células no tumorales induce un aumento en los niveles de Vimentina. Dichos resultados fueron confirmados por qPCR e inmunofluorescencia para Vimentina y E-cadherina donde observamos que las células que sobreexpresan RAC3 tienen aumentados los niveles de Vimentina y disminuídos los niveles de E-cadherina, lo cual favorece la TEM; mientras que en las células tumorales que tienen silenciados los niveles de RAC3 se observa una disminución de Vimentina y un aumento de Ecadherina. A partir de estos resultados podemos concluir que la sobreexpresión de RAC3 favorece la migración e invasión de células tumorales contribuyendo al proceso metastásico.