INVESTIGADORES
URTREGER Alejandro Jorge
congresos y reuniones científicas
Título:
PKCd reduce la producción de las enzimas proteolíticas uroquinasa (uPA) y metaloproteasa9 (MMP9) en células mamarias murinas NMuMG
Autor/es:
VALERIA C. GROSSONI; ELISA D. BAL DE KIER JOFFÉ; ALEJANDRO J. URTREGER
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; 50° Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2005
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)
Resumen:
PKCd es una serino-treonina quinasa que interviene en numerosos procesos de señalización intracelular. Anteriormente demostramos que la sobreexpresión de PKCd en células NMuMG indujo mayor capacidad proliferativa, resistencia a la apoptosis y la adquisición de la capacidad de crecer independientemente del anclaje, propiedad asociada a un fenotipo transformado. En este trabajo nos propusimos estudiar si PKCd es capaz de modular la producción de proteasas, moléculas íntimamente vinculadas con la progresión maligna. Se emplearon dos metodologías: la sobreexpresión de PKCd por transfección y la inhibición de su expresión endógena mediante ensayos de interferencia del ARN (siRNA). La sobreexpresión de PKCd se asoció a una reducción significativa en la secreción de uPA (0,52±0,04 vs. 1,59±0,1 UI/mg prot/24 hs en cél. control) y MMP-9 (2,69±0,47 vs. 0,98±0,27 UA/mg prot. en cél. control). Además, la activación de PKCd, con PMA, resultó en una reducción dosis dependiente en los niveles de proteasas secretadas, mientras que no se observaron cambios en las células control (uPA: PMA (25 nM): 0,16±0,02 UI/mg prot/24 hs; PMA (50 nM): 0,019 ±0,001 UI/mg prot/24 hs; PMA (100 nM): no detectable. p<0,05 vs. cél. control y cél. NMuMG-PKCd sin tratamiento). Similares resultados se observaron para la secreción de MMP-9. La transfección transitoria con un siRNA específico, inhibió la expresión de PKCd e indujo un incremento en la secreción de uPA (4,2±0,8 veces; p<0,05) y de MMP-9 (8,1±0,9 veces; p<0,01). La transfección con un siRNA control no moduló la producción de estas proteasas. Conclusiones Nuestros resultados demuestran que vías de señalización dependientes de PKCd son capaces de inhibir la secreción de uPA y MMP-9 en células mamarias murinas normales. Además sugieren que, a pesar de los cambios compatibles con un fenotipo transformado observados previamente, PKCd limitaría la progresión hacia un fenotipo más maligno regulando en forma negativa la motilidad e invasividad celular.