Las vías de señalización MEK/ERK y PI3K/AKT modulan el crecimiento celular y la resistencia a la apoptosis inducida por la sobreexpresion de PKCd en células mamarias murinas

VALERIA C. GROSSONI; JUAN KARLIC; MARCELO G. KAZANIETZ; ELISA D. BAL DE KIER JOFFÉ; ALEJANDRO J. URTREGER

Mar del Plata

Congreso; 51° Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2006

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

A fin de evaluar el rol de PKCd en los procesos transformación maligna y progresión tumoral se sobreexpresó esta isoforma de PKC en células mamarias murinas NMuMG. La sobreexpresión de PKCd indujo un leve incremento en la capacidad proliferativa basal (tiempo de duplicación poblacional: 15,5±2,8 hs vs 17,7±3,6 hs en cél control), pero la activación con PMA aumentó significativamente la capacidad proliferativa de estas células (p< 0,05 vs cél control). Este incremento se confirmó mediante citometría de flujo e incorporación de [3H]-timidina. El aumento en la proliferación se asoció a un incremento en la expresión de la ciclina D1 (3,5 veces, p< 0,01) y en la fosforilación de Rb (2,4 veces, p< 0.05) respecto de las células control. Además, las células NMuMG-PKCd mostraron un aumento en los niveles de pERK. La inhibición de la expresión endógena de PKCd median­te ensayos de ARN de interferencia, redujo los niveles de pERK en un 80% (p< 0.05) confirmando el papel de PKCd en la activación de esta vía. Las células PKCd fueron más resistentes a la apoptosis inducida por privación de suero o tratamiento con doxorubicina que las células control (incremento en sobrevida: 25% a 50% vs cél control, p< 0,05). El tratamiento con inhibidores farmacológicos de MEK/ERK (PD98059) y PI3K/Akt (LY94002) nos permitió determinar que la vía de Akt es la responsable de la mayor resistencia a la apoptosis. Asimismo, la insulina, factor de crecimiento ligado a la activación de PI3K incrementó 2,6 veces p< 0,05) la resistencia a la muerte celular inducida por la privación de suero en las células NMuMG-PKCd respecto a las células control. Además, la sobreexpresión de PKCd indujo la capacidad de crecer en forma independiente del anclaje, siendo este efecto más notorio luego de la activación con PMA. Estos resultados indican que PKCd controla el crecimiento y la resistencia a la apoptosis en células mamarias mediante dos vías de señalización independientes MEK/ERK y PI3K/Akt respectivamente.