Implicancia de PKCa y PKCd en el efecto de los retinoides sobre el crecimiento y la diseminación metastásica de un adenocarcinoma mamario murino

DAMIAN E. BERARDI; MARÍA INÉS DÍAZ BESSONE; PAOLA B. CAMPODÓNICO; ANDREA MOTTER; ELISA D. BAL DE KIER JOFFÉ; ALEJANDRO J. URTREGER; LAURA B. TODARO

Mar del Plata

Congreso; 55° Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

Los retinoides ejercen algunos de sus efectos sobre la diferenciación celular y reversión del fenotipo maligno a través de interacciones de sus receptores (RAR) con isoformas de PKC. Previamente demostramos que in vitro el retinoide ATRA induce retardo del crecimiento en la línea tumoral mamaria murina LM3 asociado a una modulación y redistribución de las PKCa y d. Nos proponemos analizar la interacción entre los RARs y las PKC y estudiar si las isoformas a y d de PKC influyen sobre el efecto de los retinoides en la progresión tumoral de la línea LM3. Por western blot (WB) demostramos que la inhibición farmacológica (Rottlerina) de PKCd, redujo la traslocación al núcleo del receptor RARa1 inducida por ATRA (1uM, 24h). En cambio la inhibición farmacológica de PKCa  (Gö6976) no afectó dicha traslocación. Asimismo detectamos que PKCd y RARa1 co-inmunoprecipitan luego del tratamiento con ATRA. Por otro lado, analizamos la respuesta al tratamiento con ATRA sobre el crecimiento y la diseminación metastasica in vivo cuando LM3 sobre-expresa PKCa o d. Estas sublíneas modificadas genéticamente fueron inoculadas ortotópicamente en ratones BALB/c. Cuando los tumores fueron palpables se comenzó el tratamiento con ATRA mediante pellets (10mg/ratón). Observamos que los tumores que sobreexpresan PKCa son más invasivos y metastásicos que aquellos que sobre-expresan PKCd (p<0.05). Sorprendentemente, sólo LM3-PKCa respondió al tratamiento con ATRA inhibiendo tanto el crecimiento del tumor primario como las metástasis en pulmón (55; 20-75 control vs 16; 0-27 ATRA, Md; rango, p<0.05). Similar a lo observado in vivo sólo la línea LM3-PKCa respondió con inhibición de crecimiento al tratamiento in vitro con ATRA. Conclusión: PKCd interaccionaría directamente con RARa induciendo su traslocación al núcleo como respuesta al tratamiento retinoide. Los tumores LM3-PKCa presentan mayor malignidad que LM3-PKCd, pero revierten su fenotipo maligno frente al tratamiento retinoide in vivo.