Los retinoides ejercen sus efectos en forma diferencial sobre los componentes luminales y mioepiteliales de los tumores mamarios. Identificación de la población stem/progenitora en el modelo mamario murino LM38-LP

PAOLA B. CAMPODÓNICO; DAMIAN E. BERARDI; MARIA I. DIAZ BESSONE; ALEJANDRO J. URTREGER; EDUARDO F. FARIAS; ELISA BAL DE KIER JOFFÉ; LAURA B. TODARO

Buenos Aires

Congreso; XXVII Jornadas de Oncología; 2011

Instituto de Oncología "A. H. Roffo"

El cáncer de mama es la principal causa de mortalidad por neoplasia en las mujeres. El estudio de los mecanismos que conducen a la progresión tumoral es importante en la búsqueda de nuevos blancos terapéuticos. El epitelio de la glándula mamaria se caracteriza por la presencia de dos linajes celulares: el luminal (LEP) y el mioepitelial (MEP). Ambos participan en las lesiones premalignas de la mama. Las células MEP transformadas actuarían creando un microambiente favorable para la progresión tumoral, pero poco se conoce acerca de los mecanismos involucrados en la interacción entre ambos componentes. El ácido retinoico (RA), vitamina A, es esencial en el control del desarrollo. Los efectos de los retinoides (Rds) a través de su vía clásica, están mediados por receptores nucleares (RAR/RXR), los cua les se unen a los elementos respondedores del RA (RAREs), activando la transcripción de genes importantes en diferenciación, proliferación y apoptosis. Objetivo: estudiar el efecto del tratamiento retinoide en cada uno de los compartimentos LEP/MEP de los tumores mamarios. Para ello hemos empleado como modelo la línea tumoral mamaria murina LM38-LP (generada en el Instituto A. H. Roffo), con características similares a los tumores basa les encontrados en la clínica y, que presenta tanto células LEP como MEP. Esta línea expresa todas las formas RARs (Western blot WB, RT-PCR) y las mismas son funcionales (actividad RARE-Iuciferasa). El tratamiento con RA disminuye el crecimiento de la línea LM38-LP in vitro e in vivo y su diseminación metastásica. El RA induce en la línea un arresto del ciclo celular (citometría), senescencia en las células MEP (SA-b-galactosidasa) y apoptosis sólo en el compartimiento LEP (WB, inmunofluorescencia IF, ensayo de Anexina -V). Los Rds inhiben la actividad de proteasas secretadas (zimografías y caseinólisis radial) de la línea LM38-LP, asi como también la migración (Wound Healing) y la invasión (invasión en cámaras transwell), acompañado del aumento en la adhesión a componentes de la matriz extracelular, solo en el compartimiento MEP. Por otro lado, a través de IF se ha identificado una población celular ubicada entre los componentes LEP/MEP de la línea LM38-LP que permanece insensible al tratamiento citostático o proapoptotico de los Rds. Hemos podido determinar a través de citometría y ensayo de la actividad ALDH, la presencia de una pequeña población en la línea LM38-LP con características de células stem/progenitoras. A partir de la línea LM38-LP, se han podido obtener mamosferas en cultivo en suspensión, las cuales han regenerado a la línea mixta al permitir su adhesión al plástico. Este trabajo sugiere que los Rds inhiben el crecimiento tumoral ejerciendo efectos pro-apoptóticos y citostáticos en forma diferencial sobre las subpoblaciones LEP y MEP de los tumores mamarios. La disminución de la diseminación metastásica de la línea LM38-LP frente al tratamiento con RA puede ser explicada en parte por la disminución de la capacidad invasiva y migratoria, así como un aumento de la capacidad adhesiva principalmente en el componente MEP. La presencia de células con características stem/progenitoras nos permite explicar en parte la resistencia parcial de la línea LM38-LP frente al tratamiento con Rds, lo cual la convierte en un fuerte modelo para el estudio de terapias focalizadas en la reducción del nicho stem.