Contribución de los linfocitos Intrahepáticos totales (LIH)l y de la subpoblación de células NKT en la inducción del perfil Th1 durante la infección por Candida albicans

RENNA MS,CM FIGUEREDO, MC RODRÍGUEZ-GALÁN, SG CORREA, CE SOTOMAYOR

Cordoba-Argentina

Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunologíay XI Jornada del Grupo Rioplatense de Citometría de Flujo; 2008

Sociedad Argentina de Inmunología

CONTRIBUCIÓN DE LOS LINFOCITOS INTRAHEPÁTICOS TOTALES (LIH)L Y DE LA SUBPOBLACIÓN DE CÉLULAS NKT EN LA INDUCCIÓN DEL PERFIL TH1 DURANTE LA INFECCIÓN POR Candida albicans. Renna Ms,CM Figueredo, MC Rodríguez-Galán, SG Correa, CE Sotomayor. Inmunología Facultad de Ciencias Químicas UNC.   El objetivo del presente trabajo es estudiar el rol de los LIH en la inducción del perfil Th1 vs Th2 durante la etapa temprana de la infección por C.albicans y la contribución de linfocitos NKT en la inducción de este fenómeno. En la población de LIH se estudió la producción de INF-g e IL-4(ELISA) en sobrenadantes de cultivo tanto en un sistema in vitro como ex vivo. En los estudios in vitro, LIH purificados de animales Normales(N) se enfrentaron con el hongo(relación 1/1), y luego de 24 h de contacto se observó un aumento en la producción de ambas citoquinas con respecto al basal sin el hongo (índice de incremento de INF-g: 16,53±3.54 e IL-4: 2.21±0.26) indicando un desvío hacia el perfil Th1. Para los estudios ex vivo, LIH purificados de animales N y animales infectados(Ca) se cultivaron en ausencia o en presencia del hongo(reestimulo). Luego de 24 h de cultivo, se observó que la producción espontánea de INF-g en células de animales Ca es mucho mayor que la de animales N (índice de incremento: 24,50±6,36), mientras que la producción de IL-4 no mostró cambios significativos, indicando que el contacto in vivo con el hongo produjo un marcado desvío hacia un perfil Th1. Cuando estas células son reestimuladas con C.albicans(relación 1/1) no solo mantienen este perfil, sino que además duplican la producción de INF-γ. Para evaluar la contribución de las NKT, se estudió la producción intracelular de estas citoquinas por citometría de flujo(FACS) en ambos sistemas. Cuando LIH de animales N se enfrentan con el hongo 24 h, se observa un aumento en el porcentaje de NKT productoras de INF-γ (índice de incremento con respecto al basal: 7,3±2) y un aumento en el canal medio de fluorescencia (43,46 vs 60,41; p<0,05), de manera interesante células NKT productoras de IL-4 no presentaron este comportamiento. Cuando LIH provenientes de animales Ca se dejan 24 h en cultivo se observa un mayor porcentaje de NKT productoras de ambas citoquinas pero con una tendencia nuevamente hacia el perfil Th1. Como control positivo para ambos sistemas se estimulo a las células con esteres de forbol(PMA) e ionomicina obteniéndose una máxima producción de INF-γ e IL-4(ELISA) y un máximo porcentaje de células NKT productoras de ambas citoquinas(FACS). Estos resultados muestran la contribución de los LIH y aportan nueva evidencia sobre el rol de los linfocitos NKT en la inducción de un perfil Th1 en la infección por C.albicans, lo que podría contribuir al control intrahepatico de este hongo.