La sobreexpresion de Factor de Necrosis Tumoral-alfa (TNF) y FasL induce apoptosis de celulas adenohipofisarias

M. CANDOLFI; J. YU; G. LIU; L. FERRARI; C. BARCIA; C. LIU; M. PUNTEL; D. PISERA; M. G. CASTRO; A. SEILICOVICH

Mar del Plata

Congreso; XLIX Reunion de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica, Congreso Conjunto de Sociedades Biomedicas; 2004

SAIC

LA SOBREEXPRESIÓN DE TNF-ALFA (TNF) Y FASL INDUCE APOPTOSIS DE CÉLULAS ADENOHIPOFISARIAS Candolfi, Marianela*; Yu, John^; Liu, Gentao^; Ferrari, Luciana*; Barcia, Carlos^; Liu, Chunyan^; Puntel, Mariana^; Pisera, Daniel*; Castro, María Graciela^; Seilicovich, Adriana*. (*) Centro de Investigaciones en Reproducción, Facultad de Medicina, Universidad de Buenos Aires (^) Gene Therapeutics Research Institute, Cedars Siani Medical Center, UCLA, LA, California, USA Resultados de nuestro laboratorio indican que la activación de los sistemas TNF/TNFR y FasL/Fas inducen apoptosis de células adenohipofisarias. Defectos en la inducción de apoptosis han sido involucrados en la tumorigénesis. En el presente trabajo estudiamos el efecto proapoptótico de la sobreexpresión de TNF y FasL en cultivos primarios de células adenohipofisarias de ratas hembras y en las líneas celulares adenohipofisarias, GH3 y AtT20. Las células fueron infectadas con vectores adenovirales recombinantes no replicativos que codifican para ß-Galactosidasa (Rad-hCMV-β-Gal), TNF (Rad-hCMV-TNF) o FasL (Rad-hCMV-FasL) bajo el control del promotor del citomegalovirus humano (hCMV). La expresión de β-Galactosidasa, TNF y FasL en las células infectadas fue detectada por ICQ. El análisis del ciclo celular (FACS) reveló un aumento en el porcentaje de hipodiploidía en células adenohipofisarias infectadas con Rad-hCMV-TNF o Rad-hCMV-FasL (C: 5% ± 3.1; TNF: 33.7% ± 8; FasL: 34.2% ± 4.4, p<0.01). Resultados similares fueron observados en las líneas celulares GH3 (C: 1.7% ± 0.9; TNF: 41.3% ± 2.6; FasL: 47.2% ± 5.5, p<0.01) y AtT20 (C: 3.1% ± 0.6; TNF: 71.6% ± 5.8; FasL: 33.1% ± 4.6, p<0.01). La sobreexpresión de β-Galactosidasa no afectó los porcentajes de hipodiploidía en ninguno de los sistemas estudiados. El análisis microscópico de la morfología nuclear por tinción con DAPI y TUNEL sugiere que la muerte celular inducida por la sobreexpresión de estas citoquinas es debida a la inducción de apoptosis. En conclusión, estos datos sugieren que los sistemas TNF/TNFR y FasL/Fas son funcionales tanto en células adenohipofisarias normales como tumorales y podrían participar en los procesos de muerte celular. La sobreexpresión de TNF y FasL podría contribuir al tratamiento de los tumores adenohipofisarios. Este trabajo fue realizado con subsidios de ANPCYT 3598 y FIRCA 1RO3 # TW006273-01.