INVESTIGADORES
SEIJO Jose Guillermo
congresos y reuniones científicas
Título:
Caracterización cromosómica de especies de la sección Rhizomatosae por citogenética clásica y molecular
Autor/es:
ORTIZ A; FERNANDEZ, A.; SEIJO, JG; LAVIA, G.
Lugar:
San Lorenzo Paraguay
Reunión:
Simposio; VI Encuentro Internacional de Especialistas en Arachis y II Simposio de maní en el MERCOSUR; 2008
Resumen:
CARACTERIZACIÓN CROMOSÓMICA DE ESPECIES DE LA SECCIÓN RHIZOMATOSAE POR CITOGENÉTICA CLÁSICA Y MOLECULAR1POR CITOGENÉTICA CLÁSICA Y MOLECULAR1 Ortiz A, A Fernández, JG Seijo y GI Lavia. Instituto de Botánica del Nordeste, C.C. 209, 3400, Corrientes, Argentina. ortizalejandr@gmail.com 1 Este trabajo forma parte de la tesis doctoral que se está realizando en la Facultad de Cs. Exactas, Físicas y Naturales (Universidad Nacional de Córdoba).Este trabajo forma parte de la tesis doctoral que se está realizando en la Facultad de Cs. Exactas, Físicas y Naturales (Universidad Nacional de Córdoba). INTRODUCCIÓN La sección Rhizomatosae posee el mayor porcentaje de especies poliploides del género (75%), ya que incluye tres especies tetraploides y sólo una diploide, las cuales se caracterizan por presentar rizomas como medio de reproducción vegetativa. A. glabrataRhizomatosae posee el mayor porcentaje de especies poliploides del género (75%), ya que incluye tres especies tetraploides y sólo una diploide, las cuales se caracterizan por presentar rizomas como medio de reproducción vegetativa. A. glabrataA. glabrata Benth., A. pseudovillosa (Chodat & Hassl.) Krapov. & W.C. Gregory y A. nitida Valls, Krapov. & C.E. Simpson son tetraploides con 2n=40, mientras que A. burkartii Handro es el único taxón diploide con 2n=20. El estudio de estas especies estuvo, hasta el momento, centrado en su taxonomía y en la determinación de números cromosómicos (Krapovickas & Gregory 1994, Valls & Simpson 2005, Fernández & Krapovickas 1994, Peñaloza & Valls 2005). Sin embargo, desde el punto de vista filogenético, el estudio de las especies de la sección Rhizomatosae constituye un modelo biológico sumamente interesante, dado que hasta el momento las constituciones genómicas y los progenitores putativos de las especies tetraploides no han sido determinados y sólo se conoce una especie diploide dentro de la sección. Todos los ensayos de cruzamientos realizados entre las especies de esta sección han demostrado que ninguno de los tetraploides ha producido híbridos con A. burkartii. No obstante, se han obtenido diversos híbridos entre ellos y especies diploides de las secciones Arachis (4 especies), Procumbentes (2 especies), Erectoides (4 especies), y con el maní cultivado, A. hypogaea (Krapovickas & Gregory 1994, Mallikarjuna & Sastri 2002). Estos datos permiten al menos cuestionar el origen de los tetraploides a partir de A. burkartii. Sobre la base de estos antecedentes y como parte de la caracterización genómica de la sección RhizomatosaeA. pseudovillosa (Chodat & Hassl.) Krapov. & W.C. Gregory y A. nitida Valls, Krapov. & C.E. Simpson son tetraploides con 2n=40, mientras que A. burkartii Handro es el único taxón diploide con 2n=20. El estudio de estas especies estuvo, hasta el momento, centrado en su taxonomía y en la determinación de números cromosómicos (Krapovickas & Gregory 1994, Valls & Simpson 2005, Fernández & Krapovickas 1994, Peñaloza & Valls 2005). Sin embargo, desde el punto de vista filogenético, el estudio de las especies de la sección Rhizomatosae constituye un modelo biológico sumamente interesante, dado que hasta el momento las constituciones genómicas y los progenitores putativos de las especies tetraploides no han sido determinados y sólo se conoce una especie diploide dentro de la sección. Todos los ensayos de cruzamientos realizados entre las especies de esta sección han demostrado que ninguno de los tetraploides ha producido híbridos con A. burkartii. No obstante, se han obtenido diversos híbridos entre ellos y especies diploides de las secciones Arachis (4 especies), Procumbentes (2 especies), Erectoides (4 especies), y con el maní cultivado, A. hypogaea (Krapovickas & Gregory 1994, Mallikarjuna & Sastri 2002). Estos datos permiten al menos cuestionar el origen de los tetraploides a partir de A. burkartii. Sobre la base de estos antecedentes y como parte de la caracterización genómica de la sección RhizomatosaeA. burkartii Handro es el único taxón diploide con 2n=20. El estudio de estas especies estuvo, hasta el momento, centrado en su taxonomía y en la determinación de números cromosómicos (Krapovickas & Gregory 1994, Valls & Simpson 2005, Fernández & Krapovickas 1994, Peñaloza & Valls 2005). Sin embargo, desde el punto de vista filogenético, el estudio de las especies de la sección Rhizomatosae constituye un modelo biológico sumamente interesante, dado que hasta el momento las constituciones genómicas y los progenitores putativos de las especies tetraploides no han sido determinados y sólo se conoce una especie diploide dentro de la sección. Todos los ensayos de cruzamientos realizados entre las especies de esta sección han demostrado que ninguno de los tetraploides ha producido híbridos con A. burkartii. No obstante, se han obtenido diversos híbridos entre ellos y especies diploides de las secciones Arachis (4 especies), Procumbentes (2 especies), Erectoides (4 especies), y con el maní cultivado, A. hypogaea (Krapovickas & Gregory 1994, Mallikarjuna & Sastri 2002). Estos datos permiten al menos cuestionar el origen de los tetraploides a partir de A. burkartii. Sobre la base de estos antecedentes y como parte de la caracterización genómica de la sección RhizomatosaeRhizomatosae constituye un modelo biológico sumamente interesante, dado que hasta el momento las constituciones genómicas y los progenitores putativos de las especies tetraploides no han sido determinados y sólo se conoce una especie diploide dentro de la sección. Todos los ensayos de cruzamientos realizados entre las especies de esta sección han demostrado que ninguno de los tetraploides ha producido híbridos con A. burkartii. No obstante, se han obtenido diversos híbridos entre ellos y especies diploides de las secciones Arachis (4 especies), Procumbentes (2 especies), Erectoides (4 especies), y con el maní cultivado, A. hypogaea (Krapovickas & Gregory 1994, Mallikarjuna & Sastri 2002). Estos datos permiten al menos cuestionar el origen de los tetraploides a partir de A. burkartii. Sobre la base de estos antecedentes y como parte de la caracterización genómica de la sección RhizomatosaeA. burkartii. No obstante, se han obtenido diversos híbridos entre ellos y especies diploides de las secciones Arachis (4 especies), Procumbentes (2 especies), Erectoides (4 especies), y con el maní cultivado, A. hypogaea (Krapovickas & Gregory 1994, Mallikarjuna & Sastri 2002). Estos datos permiten al menos cuestionar el origen de los tetraploides a partir de A. burkartii. Sobre la base de estos antecedentes y como parte de la caracterización genómica de la sección RhizomatosaeArachis (4 especies), Procumbentes (2 especies), Erectoides (4 especies), y con el maní cultivado, A. hypogaea (Krapovickas & Gregory 1994, Mallikarjuna & Sastri 2002). Estos datos permiten al menos cuestionar el origen de los tetraploides a partir de A. burkartii. Sobre la base de estos antecedentes y como parte de la caracterización genómica de la sección RhizomatosaeErectoides (4 especies), y con el maní cultivado, A. hypogaea (Krapovickas & Gregory 1994, Mallikarjuna & Sastri 2002). Estos datos permiten al menos cuestionar el origen de los tetraploides a partir de A. burkartii. Sobre la base de estos antecedentes y como parte de la caracterización genómica de la sección RhizomatosaeA. burkartii. Sobre la base de estos antecedentes y como parte de la caracterización genómica de la sección RhizomatosaeRhizomatosae que se realiza en el IBONE; en este oportunidad se presenta la caracterización cromosómica de A. glabrata, A. nitida y A. burkartii, por medio de técnicas de citogenética clásica y molecular, con la finalidad de aportar datos acerca de la constitución genómica de los tetraploides e inferir su relación con la entidad diploide. MATERIALES Y MÉTODOS El material estudiado fue obtenido del banco de germoplasma del IBONE, Corrientes, Argentina. Para realizar las preparaciones cromosómicas mitóticas se utilizaron ápices radicales obtenidos de rizomas, pretratados por 3 hs con 8- hidroxiquinoleína 2mM y posteriormente fijados en alcohol etílico absoluto: ácido acético (3:1) a 4ºC. Los preparados cromosómicos con técnica convencional se realizaron de acuerdo a Fernández & Krapovickas 1994 y los preparados para hibridación in situ fluorescente (FISH) siguiendo el protocolo descripto en Seijo et al. (2004). Los loci 18-25S y 5S ADNr fueron localizados utilizando las siguientes sondas provenientes de A. hypogaea fastigiata: A18S y A25S, dos fragmentos de 1573 y 3296pb, respectivamente, correspondientes a las secuencias de los ARNr 18S y 25S; y A5S, un fragmento de ~400pb correspondiente a una unidad repetida del gen 5S ARNr, incluyendo el espaciador íntergénico adyacente (Robledo & Seijo 2008). Mediante la técnica de Feulgen se contaron los números cromosómicos y se analizó la morfología de los cromosomas SAT; mientras que, por medio de la técnica de FISH se determinó yA. glabrata, A. nitida y A. burkartii, por medio de técnicas de citogenética clásica y molecular, con la finalidad de aportar datos acerca de la constitución genómica de los tetraploides e inferir su relación con la entidad diploide. MATERIALES Y MÉTODOS El material estudiado fue obtenido del banco de germoplasma del IBONE, Corrientes, Argentina. Para realizar las preparaciones cromosómicas mitóticas se utilizaron ápices radicales obtenidos de rizomas, pretratados por 3 hs con 8- hidroxiquinoleína 2mM y posteriormente fijados en alcohol etílico absoluto: ácido acético (3:1) a 4ºC. Los preparados cromosómicos con técnica convencional se realizaron de acuerdo a Fernández & Krapovickas 1994 y los preparados para hibridación in situ fluorescente (FISH) siguiendo el protocolo descripto en Seijo et al. (2004). Los loci 18-25S y 5S ADNr fueron localizados utilizando las siguientes sondas provenientes de A. hypogaea fastigiata: A18S y A25S, dos fragmentos de 1573 y 3296pb, respectivamente, correspondientes a las secuencias de los ARNr 18S y 25S; y A5S, un fragmento de ~400pb correspondiente a una unidad repetida del gen 5S ARNr, incluyendo el espaciador íntergénico adyacente (Robledo & Seijo 2008). Mediante la técnica de Feulgen se contaron los números cromosómicos y se analizó la morfología de los cromosomas SAT; mientras que, por medio de la técnica de FISH se determinó yet al. (2004). Los loci 18-25S y 5S ADNr fueron localizados utilizando las siguientes sondas provenientes de A. hypogaea fastigiata: A18S y A25S, dos fragmentos de 1573 y 3296pb, respectivamente, correspondientes a las secuencias de los ARNr 18S y 25S; y A5S, un fragmento de ~400pb correspondiente a una unidad repetida del gen 5S ARNr, incluyendo el espaciador íntergénico adyacente (Robledo & Seijo 2008). Mediante la técnica de Feulgen se contaron los números cromosómicos y se analizó la morfología de los cromosomas SAT; mientras que, por medio de la técnica de FISH se determinó yA. hypogaea fastigiata: A18S y A25S, dos fragmentos de 1573 y 3296pb, respectivamente, correspondientes a las secuencias de los ARNr 18S y 25S; y A5S, un fragmento de ~400pb correspondiente a una unidad repetida del gen 5S ARNr, incluyendo el espaciador íntergénico adyacente (Robledo & Seijo 2008). Mediante la técnica de Feulgen se contaron los números cromosómicos y se analizó la morfología de los cromosomas SAT; mientras que, por medio de la técnica de FISH se determinó y). Mediante la técnica de Feulgen se contaron los números cromosómicos y se analizó la morfología de los cromosomas SAT; mientras que, por medio de la técnica de FISH se determinó y
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