RESPUESTA DE INTERFERÓN EN CÉLULAS HUMANAS PERSISTENTEMENTE INFECTADAS CON EL ARENAVIRUS JUNÍN FRENTE A LA INFECCIÓN CON VIRUS DENGUE SEROTIPO 2

ARMIENTO, MARÍA NIEVES; SCOLARO, LUIS A.

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017

Asociación Argentina de Microbiología - Sociedad Argentina de Virología

Introducción: el interferón de tipo I (IFN-I) cumple un papel clave en larespuesta inmune contra los virus, produciéndose en grandes cantidadesluego de una infección y confiriendo un estado antiviral a células quehayan sido estimuladas por dicha citoquina. Existen dos clases dereceptores celulares capaces de reconocer ácidos nucleicos virales: losreceptores de tipo Toll (TLR) y las ARN helicasas RIG-I y MDA5. La uniónde dichos receptores con sus ligandos desencadena una cascada deseñalización que lleva finalmente a la producción de IFN-I. Los viruspertenecientes a la familia Arenaviridae son capaces de manipular elsistema inmune de sus hospedadores, lo que les permite establecerinfecciones persistentes que les posibilitan perpetuarse en la naturaleza.Asimismo, in vitro desarrollan con facilidad infecciones persistentes enlos cultivos que infectan.Objetivo: caracterizar la respuesta de IFN en células HEK293 (riñónhumano) persistentemente infectadas con el arenavirus Junín (JUNV), anivel de su producción y la susceptibilidad del cultivo frente a dichacitoquina.Metodología: la multiplicación viral se analizó a través de la técnica deUFP, y la producción de IFN mediante un ensayo biológico de protecciónde células Vero (riñón de mono) frente al desafío con virus de laestomatitis vesicular (VSV), contrastando con un patrón de IFN beta(Betaferón). La producción de IFN en cultivos persistentementeinfectados se indujo mediante sobreinfección con JUNV e infección convirus dengue serotipo 2 (DENV2). El efecto de la infección sobre laexpresión de RIG-I se analizó a través de un ensayo de western blot.Resultados: las células HEK293 infectadas con JUNV presentaron dosetapas: a) infección aguda (títulos virales con valores máximos de 1E6UFP/ml y monocapas celulares con efecto citopático (ECP) intenso) y b)infección persistente (títulos cíclicos que no superaron 1E4 UFP/mlasociados a un ECP moderado a intenso). Durante la etapa aguda sedetectó producción de IFN con valores máximos de 5000 UI/ml, mientrasque durante la etapa persistente sólo se produjo al inicio de la misma ycon valores que no superaron 1000 UI/ml. Las células HEK293 infectadaspersistentemente con JUNV (denominadas 293-3) resultaron refractariasa la sobreinfección con JUNV y no produjeron IFN. Por otro lado, tantolas células 293-3 como sus controles sin infectar resultaron protegidasfrente al desafío con VSV cuando se trataron con IFN beta (200 UI/ml).Al utilizar DENV2 como inductor, las células 293-3 produjeron IFN contítulos similares a los obtenidos en las células 293 infectadas con elmismo virus (entre 1500 y 3000 UI/ml), y ambas presentaron una mayorexpresión de RIG-I con respecto a las mismas células sin infectar einfectadas con JUNV.Conclusiones: las células HEK293 infectadas persistentemente con JUNVno son capaces de producir IFN por sí solas o en presencia de inductorescomo el virus homólogo, pero sí responden frente a una inducción conDENV2.