MODULACIÓN DIFERENCIAL DE LA INFECCIÓN POR VIRUS HERPES SIMPLEX TIPO 1 (HSV-1) EN CÉLULAS DE EPITELIO PIGMENTARIO DE LA RETINA POR DISTINTOS AGONISTAS DE LOS RECEPTORES X RETINOIDEOS (RXR)

AYALA PEÑA, VICTORIA; ARMIENTO, MARÍA NIEVES; SCOLARO, LUIS A.; GERMAN O LORENA

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología - CAV 2017; 2017

Asociación Argentina de Microbiología - Sociedad Argentina de Virología

Diversos factores generan daño en las células del Epitelio Pigmentado dela Retina (EPR), causando patologías, como la degeneración de la mácularelacionada a la edad (DMRE). La infección producida por HSV-1, generapatologías agudas y recurrencias, y se la ha propuesto como un posible factor de riesgo en la progresión de la DMRE. Demostramos que laactivación de los RXR, principalmente en su forma heterodimerizada,protege a las células del EPR de la apoptosis inducida por estrés oxidativoe inhiben la translocación nuclear de p65NFkB. Dado que la isoformaRXRα ha sido asociada a procesos de inhibición de la respuesta antiviralcelular, y que su localización nuclear está relacionada a procesos antiinflamatoriosy de prevención de muerte, nos propusimos estudiar el rolde los RXR durante la infección con HSV-1 en células de EPR. Para ello,células de EPR humano (D407) se infectaron con HSV-1 (MOI=5UFP/cel).Se las suplementó con el agonista de los RXR:RXR (LG100268), con elagonista de los heterodímeros y antagonista de los RXR:RXR (LG100754)o vehículo. Se analizó la infectividad producida (título y efecto citopático,ECP) y la actividad de interferón (IFN) por un ensayo de reducción delnúmero de placas del virus de la estomatitis vesicular; la expresión deproteínas de la vía NFκB, PARP-1 y RXRα por inmunocitoquímica y WB;los niveles de ARNm de RXRα, BAX, PPARγ y el factor de crecimientotransformante (TGF)β mediante qRT-PCR. En este trabajo mostramosque la infección por HSV-1 generó un ECP característico y que eltratamiento con LG100268 lo redujo, como así también el título viral, locual no fue observable en aquellos tratados con LG100754. La infecciónviral incrementó la activación de la vía NFkB, y disminuyó los niveles deARNm de TGFβ y del receptor PPARγ, involucrados en las respuestasantiinflamatorias, pero no alteró la actividad de IFN respeto de lascondiciones sin infectar. Además, la infección incrementó la síntesis yexpresión de RXRα, observándose una localización citoplasmática deeste receptor. En las condiciones infectadas, ambos agonistasincrementaron el ARNm de BAX, disminuyeron la activación de la víaNFκB y la actividad de interferón, y no lograron revertir la inhibición dela síntesis del ARNm de TGFβ inducida por la infección. AdemásLG100268 incrementó los niveles de PARP-1 total y clivado, del ARNm dePPARγ, y disminuyó la expresión de RXRα, a diferencia del incrementopronunciado que indujo LG100754. Nuestros resultados indican que lainfección de las células de EPR por HSV-1 favorece un estado proinflamatorio,y que a los tiempos estudiados, el tratamiento con losagonistas modulan el nivel de expresión de los RXR, inhiben la actividadbasal de IFN e inhiben la activación de la vía NFkB inducida por el virus,sugiriendo que la disminución del ECP y título viral inducida porLG100268 podría deberse a un efecto virucida directo o que el agonistapropicie un estado más vulnerable a la muerte en células infectadas