ROL DE LA NUCLEOPROTEÍNA VIRAL EN LA REPLICACIÓN IN VITRO DEL VIRUS JUNÍN

SCOLARO, LUIS A.

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología - CAV 2017; 2017

Sociedad Argentina de Virología - Asociación Argentina de Virología

La nucleoproteína (N) del arenavirus Junín (JUNV), agente etiológico dela fiebre hemorrágica argentina, es el antígeno viral más abundante enla célula infectada. N cumple funciones estructurales organizando lanucleocápside del virus como así también enzimáticas participando enlos procesos de replicación, transcripción y traducción. Esta proteínamodula distintas vías de señalización celular, en particular aquellasligadas con los procesos de supervivencia, muerte y regulación del ciclocelular, como también aquellas asociadas a la inmunidad intrínseca de lacélula. La infección de cultivos celulares con JUNV se caracteriza porpresentar dos etapas definidas: una inicial, denominada agudacaracterizada por la producción de altos títulos de infectividad yaparición de efecto citopático, ECP y una que la sucede, denominadapersistente en la que la producción de infectividad es escasa o nula y nohay aparición de ECP. En ambas etapas, N se expresa a niveles altos,mientras que la síntesis de las glicoproteínas virales, G1 y G2, expuestasen la membrana celular, es mínima o indetectable durante lapersistencia. En el inicio de la infección, G1 es reconocida por el receptorcelular y media el proceso de adsorción del virus a la célula, que concluyecon la endocitosis de la partícula viral. G2, asociada a un péptidofusogénico, lleva a cabo la fusión, dependiente del pH, entre lamembrana endosomal y la envoltura viral, provocando así eldesnudamiento viral. Una característica distintiva de las célulaspersistentemente infectadas es la marcada capacidad fusogénica que exhiben cuando son sometidas a pH inferior a 5,5. Este hecho resultasorprendente considerado los niveles mínimos de glicoproteínas viralespresentes en estas células. Una posible explicación a esta observaciónsería considerar a otro antígeno viral, abundante durante la persistencia,que también participe del proceso de fusión, como podría ser N.Recientemente, hemos obtenido anticuerpos de cadena pesada dedominio único (VHHs), también conocidos como nanoanticuerpos, antiJUNV,a partir de la inmunización de una alpaca con la cepa atenuadaCandid#1 de JUNV. Estos VHHs, propios de los camélidos, poseen unaestructura molecular más pequeña que los anticuerpos convencionales,ya que sólo están compuestos por una cadena pesada deinmunoglobulina, es así que pueden acceder a epitopes ?ocultos? a losanticuerpos convencionales por problemas estéricos. Los VHHsobtenidos neutralizaron eficientemente a Candid#1 pero no así a la cepapatógena XJ, aunque fueron capaces de unirse a células infectadas conambas cepas, incluso a la superficie de las mismas. Se comprobó que laneutralización ocurre a consecuencia de un bloqueo a nivel de la fusión.Sin embargo, en contraposición a lo esperado, se encontró que estosVHHs no tienen como blanco a G1 o G2, sino a N. Estos resultadospermiten, además de asignar a N un rol importante en el proceso defusión de membranas mediado por proteínas virales, especular acercade su interacción diferencial con las glicoproteínas de JUNV de acuerdoa la virulencia de la cepa ensayada.