La esfingosina 1 fosfato, nuevo mediador de la migración de las células epiteliales de retina en la retinopatía diabética?

SIMON M.V.; VERA M; PRADO SPALM F.H.; ROTSTEIN N.P.

Ciudad de Córdoba, Córdoba

Congreso; XII Reunión Anual AIVO; 2018

AIVO

La esfingosina 1 fosfato, nuevo mediador de la migración de las células epiteliales de retina en la retinopatía diabética?Sphingosine-1- phosphate: a novel mediator in retinal pigmented epithelial cells migration during diabetic retinopathies? Simón MV, Vera MS, Prado Spalm FH, y Rotstein NP. Instituto de investigaciones Bioquímicas, Depto. De Biología, Bioquímica y Farmacia, Universidad Nacional del Sur-CONICET. Objetivos: Las enfermedades proliferativas de la retina, como la retinopatía diabética, son causa frecuente de ceguera. Se caracterizan por la excesiva proliferación y migración de dos tipos celulares esenciales para el normal funcionamiento de la retina: las células gliales de Müller (CGM) y el epitelio pigmentado de la retina (EPR). Demostramos que la esfingosina-1- fosfato (S1P), un esfingolípido bioactivo, aumenta la migración de las CGM (Simón et al., 2015). Investigamos ahora si la S1P induce la migración de células del EPR, y si lo hace en un modelo in vitro de retinopatía diabética. Métodos:Cultivos confluentes de ARPE19, línea de EPR humano, se suplementaron con S1P 5 uM por 24 hy la migración se analizó por el ensayo de cicatriz. Para evaluar si la S1P activa las vías ERK/MAPK, PI3K y/o p38 MAPK para inducir la migración celular, los cultivos fueron pre-incubados con U0126, Ly294002 o SB203580, antagonistas respectivos de dichas vías. Para determinar si la S1P activa al receptor de membrana S1P3, reconocido partícipe de la migración celular, los cultivos se pre-incubaron con su antagonista BML241; y para evaluar si la síntesis endógena de S1P, catalizada por la esfingosina quinasa 1 (SphK1) es requerida para inducir la migración, con SphKI2, inhibidor de SphK1. Para indagar el rol de la S1P en la migración epitelial en la retinopatía diabética, las ARPE19 se incubaron 48 h con alta glucosa (30 mM). Resultados:El agregado de S1P estimuló la migración de ARPE19. Dicha migración se inhibió con la pre-incubación con BML241 y con Ly294002, U0126 y SB 203580, lo que sugiere que la S1P induce la migración del EPR a través de la activación del S1P3 y de las vías ERK/MAPK, PI3K y p38 MAPK. La pre-incubación con SphKI2 redujo la migración, que solo se recuperó parcialmente con el agregado de S1P, indicando que la síntesis endógena de S1P es crucial para promover la migración celular y la S1P exógena estimularía dicha síntesis.La alta glucosa estimuló la migración de las ARPE19, y la inhibición de la síntesis de S1P frenó dicha migración, lo que sugiere que la S1P endógena regularía la motilidad celular estimulada por la alta glucosa.Conclusiones:Estos hallazgos permiten proponer un rol clave para el eje S1P/SphK1/S1P3 en la migración de las células gliales y epiteliales de la retina, exacerbada en la retinopatía diabética, y sugieren que la regulación de este eje constituiría un nuevo blanco terapéutico para el tratamiento de esta enfermedad.Financiación: subsidios de SECyT, UNS; CONICET y FONCYT.