INVESTIGADORES
ROTSTEIN Nora Patricia
congresos y reuniones científicas
Título:
El Ácido Retinoico: promotor de la diferenciación de fotorreceptores de retina in vitro.
Autor/es:
DE GENARO P.; ROTSTEIN NP; POLITI LE
Lugar:
Buenos AIres
Reunión:
Congreso; 6a Reunión Anual AIVO; 2009
Institución organizadora:
AIVO
Resumen:
El Ácido Retinoico promueve la diferenciación de fotorreceptores
de retina in vitro.
Pablo De Genaro, Nora
Rotstein y Luis Politi.
Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca
(INIBIBB, Universidad Nacional del Sur (UNS)-CONICET. 8000 Bahía Blanca,
Argentina.
E-mail:
pdgenaro@criba.edu.ar
Objetivo: La vitamina A juega
un papel crucial en el desarrollo y funcionamiento del ojo. Sus metabolitos mas
importantes son el Retinal, que junto
con la proteína opsina forman el
pigmento visual, y el Ácido Retinoico
(AR). Trabajos previos sugieren que el AR intervendría en el desarrollo inicial
de la retina y en la maduración de los fotorreceptores (FR); sin embargo, aún se
desconocen sus efectos sobre aspectos específicos del desarrollo de estas neuronas.
En este trabajo analizamos los efectos del AR sobre el desarrollo de los FR de
rata in vitro.
Métodos: Utilizamos cultivos neuronales
de retinas de ratas recién nacidas, desarrollados en medios químicamente
definidos, tratados o no (control), con AR todo-trans.
A distintos tiempos del desarrollo se analizó la expresión de marcadores de los
FR, como el factor de transcripción Crx, opsina y periferina, y del marcador de
neuronas amacrinas HPC-1. Además, se investigó el desarrollo de neuritas, la
incorporación de Bromodeoxiuridina (BrdU) y el nivel de fosforilación de p38-MAPK
por métodos inmunocitoquímicos y Western Blot.
Resultados: Mientras que en
cultivos controles solo una pequeña proporción de células expresó opsina, esta
expresión aproximadamente se duplicó en cultivos tratados con AR. A su vez, el
AR incrementó en los FR el desarrollo de procesos apicales, la expresión de periferina,
el número y longitud de las neuritas así como en los niveles de fosforilación
de p38-MAPK, quinasa que participa en
la fosforilación y activación de los receptores de AR. Por otro lado, el AR no afectó
la progresión del ciclo celular ya que no modificó los niveles de incorporación
de BrdU, ni el número de FR que expresaron Crx..
Conclusión: Estos resultados sugieren
que en nuestras condiciones de cultivo y a estos tiempos del desarrollo el AR
no regularía la proliferación ni promovería la diferenciación de neuroblastos
en FR. El AR actuaría una vez abandonado el ciclo celular, promoviendo la
diferenciación de los FR durante su desarrollo temprano, siendo la vía de la
p38-MAPK una de que activaría para
ejercer sus efectos sobre los FR..
Subsidios: CONICET, ANPCYT y UNS
