ESTUDIO DEL MECANISMO INVOLUCRADO EN LA ESTIMULACION DE LA LIBERACION DE ASPARTATO POR INHIBICION DE LA BOMBA DE SODIO.

M. G. BERSIER; V. MIKSZTOWICZ; C. PEÑA; G. RODRÍGUEZ DE LORES ARNAIZ.

del Plata, Pcia. de Buenos Aires, Argentina

Congreso; Primer Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas SAIC – SAI – SAFE – SAN – SABiología – SABiofísica – SAF; 2004

SAIC – SAI – SAFE – SAN – SABiología – SABiofísica – SAF

ESTUDIO DEL MECANISMO INVOLUCRADo en la estimulación de la liberación de aspartato por inhibición de la bomba de sodio M. G. Bersier, V. Miksztowicz, C. Peña y G. Rodríguez de Lores Arnaiz.  Instituto de Biología Celular y Neurociencias “Prof. E. De Robertis”, Facultad de Medicina, Cátedra de Farmacología e IQUIFIB-CONICET, Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA, Paraguay 2155, 1121-Buenos Aires, Argentina. E-mail: grodrig@ffyb.uba.ar La inhibición de la bomba de sodio aumenta la liberación de neurotransmisores. En trabajos anteriores de este laboratorio se aisló una fracción del cerebro, endobaína E, con propiedades similares a la ouabaína, incluyendo el aumento de la liberación de neurotrasmisores. El objetivo de este trabajo fue analizar si ese efecto era sobre la exocitosis y/o por inversión del transportador y la posible participación de los receptores glutamatérgicos. Se trabajó con sinaptosomas de corteza cerebral de ratas Wistar aislados por centrifugación diferencial y gradiente de Percoll. La endobaína E se aisló de la fracción soluble de corteza cerebral de rata mediante HPLC de intercambio aniónico. Los sinaptosomas fueron preincubados en buffer HEPES-solución salina con D-[3H]Aspartato 1 mM (15 min a 37ºC), y luego incubados en presencia de drogas (60 seg) a 37º, 25º y 18ºC, con respecto al control sin agregados (100 % de liberación), la liberación de aspartato por endobaína E a 37º, 25º y 18ºC fue 370±30 (4), 296±4 (4) y 261±18 (4), respectivamente. En presencia de 1 mM ouabaína, la liberación fue de 270±17 (5), 192±55 (4) y 132±18 (7). Con los antagonistas de los receptores glutamatérgicos se observó que el MPEP (selectivo para el subtipo mGluR5) disminuyó un 50% la liberación por la ouabaína, mientras que no alteró el efecto de la endobaína E. Otros antagonistas como el LY 367385 (selectivo para el subtipo mGluR1) y la dizocilpina (selectivo para receptor el ionótropico NMDA), no mostraron efecto. Dado que al disminuir la temperatura se ve una disminución en la liberación con endobaína y ouabaína, se podría inferir que el mecanismo de liberación afectado es la inversión del tranportador y no la exocitosis y que el receptor mGluR5 participaría en el efecto de la ouabaína sobre la liberación de neurotransmisores.