La acidez del medio extracelular induce migración en células de cáncer de mama mediante la vía de señalización AhR/c-Src

NOELIA MIRET; LORENA ZÁRATE; FERNANDO ERRA DÍAZ; CAROLINA PONTILLO; LEANDRO CEBALLOS; FLORENCIA CHIAPPINI; JORGE GEFFNER; ANDREA RANDI

Buenos Aires

Congreso; XXXIV Jornadas Multidisciplinarias de Oncología Ángel Roffo Oncología Traslacional y Enfoque Interdisciplinario: desafíos actuales y futuros; 2019

Instituto Roffo

La mayoría de los tumores malignos presentan una reducción en el pH extracelular (pHe). El receptor dehidrocarburos aromáticos (AhR) es un factor de transcripción activado porligando, localizado en un complejo citosólico con la quinasa c-Src, lo que lepermite desencadenar efectos no genómicos a través de la activación de estaquinasa. Previamente reportamos que la activación del camino AhR/c-Src induce un fenotipo migratorio tanto en células de glándula mamaria (NMuMG) como tumorales(MDA-MB-231). Teniendo en cuenta que este microambiente tumoralligeramente ácido promueve la progresión del cáncer de mama, proponemos que lavía de señalización del AhR/c-Src podría activarse por el cambio en el pHe. Evaluamos el efecto del pHe 6.5 en el eje AhR/c-Src (WB) en dos líneascelulares de cáncer de mama (MDA-MB-231 y LM3) y en una línea celular deepitelio mamario (NMuMG), así como su correlación con la migración celular(ensayo de cicatrización de la herida) y la actividad de metaloproteasas (MMP)-2y 9 (zimografía). El pHe del medio se ajustó empleando una solución isotónicade HCl.Los resultados mostraron que laacidosis aumentó la fosforilación de c-Src solo en las células de cáncer demama (MDA-MB-231 a las 4-6 h, p <0.01; LM3 a las 2-4 h, p <0.05). La presenciadel inhibidor del AhR 4,7-o-fenantrolina (PHE, 50 µM) evitó la activación dec-Src en MDA-MB-231 (p <0.05). La acidosis aumentó la migración de las células MDA-MB-231 y LM3 (p <0.01) y la actividad de MMP-9 en ambas líneas (p<0.05). Además, todos estos efectos fueron bloqueados cuando las células setrataron con PHE o con el inhibidor de c-Src PP2 (0.2 nM) (p <0.05). El indicador BCECF-AM se utilizó para medir el pH citosólico (pHi) en las células MDA-MB-231.Tras el tratamiento con pHe 6.5, se encontró una disminución en el pHi de 7.6 a6.9 (p <0.001). Para evaluar si la reducción de pHi está relacionada con laactivación de la vía AhR/c-Src, las células MDA-MB-231 se trataron con amiloride(100 µM), un inhibidor de la proteína de intercambio Na+/H+1 (NHE1), ya que se conoce que reduce el pHi. El amiloride indujo la fosforilación de c-Src y esto se evitó con el tratamiento con PHE (p <0.01).En conclusión, la acidosis estimulala vía AhR/c-Src solo en las células de cáncer de mama, lo que incrementa lamigración celular y la actividad de MMP-9. Aunque el mecanismo por el cual el pHe activa al AhR aún no es claro, la reducción del pHi podría estar involucrada. &lt;!-- /* Font Definitions */ @font-face{font-family:"Cambria Math";panose-1:2 4 5 3 5 4 6 3 2 4;mso-font-charset:0;mso-generic-font-family:roman;mso-font-pitch:variable;mso-font-signature:-536870145 1107305727 0 0 415 0;}@font-face{font-family:Calibri;panose-1:2 15 5 2 2 2 4 3 2 4;mso-font-charset:0;mso-generic-font-family:swiss;mso-font-pitch:variable;mso-font-signature:-536859905 -1073732485 9 0 511 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal{mso-style-unhide:no;mso-style-qformat:yes;mso-style-parent:"";margin-top:0cm;margin-right:0cm;margin-bottom:8.0pt;margin-left:0cm;line-height:107%;mso-pagination:widow-orphan;font-size:11.0pt;font-family:"Calibri",sans-serif;mso-ascii-font-family:Calibri;mso-ascii-theme-font:minor-latin;mso-fareast-font-family:Calibri;mso-fareast-theme-font:minor-latin;mso-hansi-font-family:Calibri;mso-hansi-theme-font:minor-latin;mso-bidi-font-family:"Times New Roman";mso-bidi-theme-font:minor-bidi;mso-fareast-language:EN-US;}.MsoChpDefault{mso-style-type:export-only;mso-default-props:yes;font-size:11.0pt;mso-ansi-font-size:11.0pt;mso-bidi-font-size:11.0pt;font-family:"Calibri",sans-serif;mso-ascii-font-family:Calibri;mso-ascii-theme-font:minor-latin;mso-fareast-font-family:Calibri;mso-fareast-theme-font:minor-latin;mso-hansi-font-family:Calibri;mso-hansi-theme-font:minor-latin;mso-bidi-font-family:"Times New Roman";mso-bidi-theme-font:minor-bidi;mso-fareast-language:EN-US;}.MsoPapDefault{mso-style-type:export-only;margin-bottom:8.0pt;line-height:107%;}size:612.0pt 792.0pt;margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm;mso-header-margin:35.4pt;mso-footer-margin:35.4pt;mso-paper-source:0;}div.WordSection1{page:WordSection1;}