Expresión de isoformas del Receptor de Estrógeno-α y niveles de AP-1 en tejido mamario de ratas durante el desarrollo tumoral

ALICIA GUTIÉRREZ; LAURA ALVAREZ; LORENA SAMBUCO; ROSA BERGOC; GABRIELA MARTÍN; ANDREA RANDI

Buenos Aires

Jornada; XXXI Jornadas Multidisciplinarias de Oncología del Instituto Angel Roffo,; 2016

Instituto de Oncología Angel Roffo

En trabajos previos de nuestro laboratorio observamos que el contenido de c-Fos nuclear se relaciona con la proliferación a lo largo del desarrollo tumoral en un modelo de tumores mamarios inducidos por N-Nitroso-N-metilurea (NMU) en ratas. Los estrógenos y los factores de crecimiento inducen proliferación y expresión de c-Fos en células de cáncer de mama. A su vez, la unión de c-Fos y c-Jun al sitio AP-1 es necesaria para la acción del Receptor de Estrógenos α (RE-α). Recientemente se encontraron variantes del RE-α expresadas en glándula mamaria y en células de cáncer mamario como la de 46 kDa, que puede interferir con la capacidad de iniciar la transcripción de la isoforma wild type de 67 kDa. Nuestro objetivo fue estudiar en glándula mamaria de rata a lo largo del proceso carcinogénico (modelo inducido por NMU): a) proliferación celular por PCNA (inmunohistoquímica, IHQ), b) expresión de AP-1 (inmunoprecipitación de fosfo-Ser69-c-Jun y luego inmunoblot), c) niveles de isoformas del REα de 67 y 46 kDa (inmunoblot) y d) niveles de expresión de ARNm de β-caseína (RT-PCR). Ratas hembras fueron separadas en dos grupos: Control (C) e inyectadas con NMU i.p. 50 mg/kg p.c. (NMU) a 50, 80 y 110 días de vida y se tomaron muestras de mamas a los 60, 90, 120 y 150 días. Resultados: Los niveles de PCNA incrementan significativamente en mamas NMU con respecto a mamas C en todos los tiempos. Además la expresión fue aumentando en función de la edad del animal en ambos tratamientos. Los niveles de proteína c-Fos asociados a fosfo-Ser69-cJun (AP-1) aumentan en C a 120 d, en cambio en NMU a 90 d y 120 d. La expresión proteica de la isoforma de 46 kDa del REα versus la de 67 kDa aumenta en función del desarrollo tumoral en NMU, mientras que en las mamas C no se observan diferencias entre ambas. Los niveles de ARNm de β-caseína utilizado como marcador de diferenciación mamaria, incrementa con la edad del animal en las mamas C, mientras que en las NMU disminuyen. Conclusión: Tanto en las mamas C como en las NMU el aumento en el contenido de PCNA coincide con el incremento en la expresión de AP-1, siendo mayor en las NMU. No encontramos asociación entre las variantes del REα y el aumento de la proliferación celular.