"Mecanismo de acción del Hexaclorobenceno sobre el Receptor de Hidrocarburos Aromáticos y la actividad de la c-Src quinasa en hígado de rata"

ANDREA RANDI; VERÓNICA CARBONE; JULIÁN CARDOZO; RODOLFO KOLLIKER FRERS; DIANA KLEIMAN DE PISAREV

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

SAIC, SAI, SAB, SAFE y SAN

El Hexaclorobenceno (HCB) es un pesticida organoclorado de alta persistencia en el ambiente, detectándose en alimentos y tejidos humanos. Como tóxico «tipo dioxina» se une al Receptor de Hidrocarburos Aromáticos (RHA) citosólico, un factor de transcripción formando complejos con la Src-quinasa. La unión al RHA provocaría que:1)la Src-quinasa active receptores de factores de crecimiento y 2)el complejo tóxico-RHA se transloque al núcleo. Recientemente demostramos que el HCB produce un aumento de la actividad del Receptor de Factor de Crecimiento Epidérmico e incrementa los niveles de c-Fos, c-Jun y c-Myc. Objetivo: estudiar si el tratamiento in vivo con HCB en función del tiempo y de la dosis afectaba: a)los niveles de RHA citosólico y su translocación al núcleo; b)las cantidades de Src quinasa y su actividad. Ratas intoxicadas con HCB a diferentes dosis (0;1;10 y 100 mg/kg p.c.) durante 30 días; y tiempos (0;12 hs,24hs,10 y 30 días) con HCB (1 mg/kg p.c.), se usaron para determinar niveles de RHA y Src-quinasa desde citosoles, microsomas y proteínas nucleares hepáticos mediante inmunoprecipitación e inmunoblot, y la actividad por ensayo de quinasa de inmunocomplejos con sustrato RR-SRC. Resultados: a) Curva de dosis: el HCB indujo translocación de los RHA desde el citosol (HCB[1]:63%; p<0.001) al núcleo (HCB[1]:153%;p<0.05) y aumentó la actividad de Src desde 10mg/kg (C:0,08±0,02; HCB[1]0: 0,26±0,07pmol/min.mg;p<0.05). b) Curva de tiempo: el HCB incrementó los niveles de RHA citosólicos a las 12hs (HCB[12hs]: 400%;p<0.001) y nucleares a 24hs y 10 días (HCB[24hs]:95% y HCB[10d]:80%;p<0.05) y aumentó la actividad de Src-quinasa desde las 24hs (C:0,13±0,01y HCB[24hs]:0,37±0,07pmol/ min.mg;p<0.01). El HCB induce la translocación del RHA hacia el núcleo y aumenta la actividad de Src desde las 24 horas de tratamiento. El presente trabajo muestra por primera vez, dos eventos fundamentales en el mecanismo de acción de este tóxico ambiental.