Exposici¨®n de c¨¦lulas de endometrio humano a pesticidas organoclorados

FLORENCIA CHIAPPINI; AGUSTINA VACCAREZZA; CAROLINA PONTILLO; NOELIA MIRET; LAURA ALVAREZ; DIANA KLEIMAN; MARIANA FARINA; ANDREA RANDI

Buenos Aires

Congreso; XXXI Congreso Internacional de Obstetricia y Ginecolog¨ªa SOGIBA 2013; 2012

Sociedad de Ginecolog¨ªa y Obstetricia

  La endometriosis es un desorden ginecol¨®gico que afecta a gran parte de las mujeres en edad reproductiva, causando discapacidad asociada con dismenorrea, dolor p¨¦lvico y subfertilidad. Algunos pesticidas organoclorados pueden inducir endometriosis por modulaci¨®n de la funci¨®n endocrina e inmune. El Hexaclorobenceno (HCB) es un contaminante ambiental persistente con efectos t¨®xicos en humanos y en animales de laboratorio. A nivel regional, este pesticida organoclorado fue encontrado en leche materna de pu¨¦rperas y en muestras de leche vacuna para consumo humano. El alimento contaminado es la principal fuente de exposici¨®n ambiental, ocurriendo tambi¨¦n por inhalaci¨®n de aire contaminado, a trav¨¦s del ¨²tero y la leche materna. La exposici¨®n de animales de laboratorio al HCB, produce hipotiroxinemia, disfunciones reproductivas e inmunomodulaci¨®n. Se observ¨® en c¨¦lulas epiteliales y estromales de endometrio humano, que la prostaglandina E2 producida por la Ciclooxigenasa 2 (COX-2) induce activaci¨®n de c-Src (prote¨ªna quinasa de tirosina) a trav¨¦s de receptores de prostaglandinas EP2/EP4. Esto conduce a la liberacion de metaloproteasas (MMPs) y favorece el desarrollo de endometriosis.Nuestro objetivo fue estudiar el efecto del HCB sobre par¨¢metros moleculares e inflamatorios que conducen al desarrollo de la endometriosis. Para ello, evaluamos la acci¨®n del HCB (0.005, 0.05, 0.5 y 5 ¦ÌM) sobre: a) viabilidad celular, b) actividad y expresi¨®n de MMP2 y MMP9, c) activaci¨®n de c-Src, y d) expresi¨®n de COX-2 en fibroblastos de ¨²tero humano HUF. Para evaluar la viabilidad celular, utilizamos el ensayo de MTT. Para analizar la actividad de MMPs, usamos la t¨¦cnica de zimograf¨ªa en gel, y para el estudio de la expresi¨®n de COX-2 y activaci¨®n de c-Src, utilizamos inmunoblot.Observamos que el pesticida no afecta la viabilidad celular a ninguna de las dosis evaluadas. Por otro lado, encontramos que el HCB (0.5 ¦ÌM) induce un aumento en la expresi¨®n y actividad de la MMP9, as¨ª como en la actividad de MMP2 en c¨¦lulas HUF. Para confirmar estos resultados, investigamos la acci¨®n del pesticida sobre la actividad de MMPs en c¨¦lulas estromales de endometrio humano (T-HESC), obteni¨¦ndose perfiles similares. Adem¨¢s, encontramos que el pesticida aumenta la expresi¨®n proteica de COX-2 y la activacion de la quinasa c-Src en c¨¦lulas HUF.Nuestros resultados sugieren que el pesticida organoclorado HCB favorece el desarrollo de endometriosis, alterando algunos par¨¢metros involucrados en inflamaci¨®n e invasion en c¨¦lulas de endometrio humano