El Hexaclorobenceno induce hipofuncionalidad en células tiroideas FRLT-5 y un aumento de la apoptosis mediada por ERK1/ 2

FLORENCIA CHIAPPINI; LAURA ALVAREZ; CAROLINA PONTILLO; ANDREA RANDI; DIANA KLEIMAN DE PISAREV

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

SAIC, SAFIS y SAFE

El hexaclorobenceno (HCB) es un contaminante ambiental deletéreo para la salud humana. En animales induce porfiria, disfunciones tiroideas, reproductivas, e inmunológicas y carcinogénesis hepática, mamaria y tiroidea.  Demostramos previamente que el HCB, induce la expresión de TGF-β1 y apoptosis, así como la activación de las MAPKs en células FRTL-5.  El TGF-β1 aumenta la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) resultando en la activación de enzimas antioxidantes. Los ROS actúan como mensajeros intracelulares de la señal apoptótica. Objetivos: Estudiar el efecto del HCB sobre parámetros funcionales tiroideos, el estado oxidativo celular y determinar la participación de  ERK1/2 en la apoptosis en células tiroideas de rata FRTL-5. Se realizaron ensayos en función del tiempo (2, 6, 8, 24 y 48h) con HCB 5 μM y de la dosis (0,005; 0,05; 0,5 y 5 μM) a las 8h y 24h. Se evaluaron: a) los niveles de tiroglobulina (TG), de ERK1/2-P, y de caspasa-3 clivada por Western blot; b) la viabilidad celular por el ensayo de MTT y c) la expresión de la enzima catalasa por RT-PCR. Resultados: a) los niveles de TG disminuyeron 50% (p?0.05) con HCB 5 μM (24h); b) la viabilidad celular disminuyó en función del tiempo (p?0.05) y de la dosis (p?0.01) de manera similar a la activación de la caspasa-3 la cual  presentó un pico a las 8h (460%, p?0.05); c) los niveles de ERK1/2-P aumentaron en función de la dosis y del tiempo con un pico a las 8h (208%, p?0.05);  d) el pre-tratamiento con PD98059, un inhibidor específico de ERK1/2 llevó la viabilidad a los niveles controles (HCB 5 μM, 24h); e) la expresión de la enzima catalasa aumentó de manera dosis dependiente (100% p?0.01, 140% p?0.001 y 150% p?0.001 HCB 0.005, 0.5 y 5 μM respectivamente) a las 8h. Conclusión: El HCB altera la funcionalidad celular, e induce apoptosis dependiente de la vía de ERK1/2 en células FRLT-5. Los resultados sugieren que los ROS podrían estar involucrados en el mecanismo de acción del mismo.