EL HEXACLOROBENCENO ALTERA LOS NIVELES DE PROTEÍNAS REGULADORAS DEL CICLO CELULAR E INDUCE SU ARRESTO

FLORENCIA CHIAPPINI; CAROLINA PONTILLO; LAURA ALVAREZ; ANDREA RANDI.; DIANA KLEIMAN DE PISAREV

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2012

SAIC-SAI

Resumen : El hexaclorobenceno (HCB) es un contaminante ambiental persistente que produce efectos deletéreos sobre la salud. Su administración crónica a animales de laboratorio genera disfunciones tiroideas y reproductivas. Demostramos que el HCB aumenta la expresión de TGF-β1 y la apoptosis en células foliculares tiroideas, FRTL-5. El TGF-β1, inhibe la función y la proliferación de células epiteliales tiroideas, y regula la expresión de proteínas del ciclo celular (p15, p16, p21 y p27) induciendo arresto y apoptosis, dependiente de especies reactivas de oxígeno (ROS). Objetivos: evaluar en células FRTL-5: a) la progresión del ciclo celular por citometría de flujo (tinción con ioduro de propidio) y los niveles proteicos nucleares de p27 y ciclina D1 por western blot; b) el rol de TGF-β1 en la inducción de apoptosis mediada por la vía de los SMAD, evaluando la viabilidad celular (ensayo de MTT), en presencia SB431542, un inhibidor del receptor tipo I de TGF-β1; c) la funcionalidad celular por los niveles proteicos de tiroglobulina (TG) por western blot. Las células fueron expuestas al HCB (0,005; 0,05; 0,5 y 5 µM) o vehículo, durante distintos tiempos (2, 4, 6, 8, 24, 30 y 72h). Resultados: Los niveles nucleares de p27 aumentaron significativamente a las 2, 4 y 6h (165, 114 y 96%), mientras que los de ciclina D1 disminuyeron a las 4, 6, 24 y 30h con HCB (5 µM) (40, 50, 60 y 80%) en relación con las células control. El ciclo celular se arrestó en G1 (72h) y G2/M (HCB 5 µM, 24h). El TGF-β1 no está involucrado en la apoptosis inducida por el HCB por la vía de los SMAD. La exposición al HCB (5µM, 24h) disminuye los niveles de TG (50%), afectando la funcionalidad celular. Nuestros resultados demuestran que el HCB altera funciones tiroideas, y produce un desbalance en la homeostasis del crecimiento de células FRTL-5 induciendo apoptosis independientemente de TGF-β1, y el arresto del ciclo celular.