ACTIVACIÓN DE LAS VÍAS DE SEÑALIZACIÓN DEL TGF-BETA 1 EN LA LÍNEA CELULAR DE CÀNCER DE MAMA HUMANO MDA-MB-231 POR HEXACLOROBENCENO.

NOELIA MIRET; CAROLINA PONTILLO; FLORENCIA CHIAPPINI; LAURA ALVAREZ; DIANA KLEIMAN DE PISAREV; CLARA VENTURA; CLAUDIA COCCA; ANDREA RANDI

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2012

SAIC

El Hexaclorobenceno (HCB) es un pesticida organoclorado encontrado en leche materna y en leche de consumo humano. Se une al Receptor de Hidrocarburos Aromáticos (RHA), estimulando vías de señalización de membrana y nucleares. Hemos demostrado que el HCB es co-carcinogénico en la formación de tumores mamarios en rata, e induce migración e invasión en la línea celular de cáncer de mama humano MDA-MB-231. El TGF-β1 regula procesos como proliferación, diferenciación, migración y apoptosis. Se une a receptores de membrana y actúa por tres diferentes caminos, uno dependiente de Smad y dos independientes de Smad (PI3K-ERK1/2; JNK-p38) modulando la migración e invasión celular. Nuestro objetivo fue estudiar si el HCB activa las vías de señalización del TGF-β1 dependientes e independientes de Smad, y si TGF-β1 y RHA modulan la migración en MDA-MB-231. Las células fueron tratadas con HCB (0.05 µM) en curvas de tiempo (0, 5, 15 y 30 min, 2 y 24 hs), o en curvas de dosis con HCB (0, 0.005, 0.05, 0.5 y 5 µM) durante 5 y 15 min para estudios de inmunoblot. Los ensayos de migración en transwell se realizaron con HCB (5 µM) a 24 horas con pre-tratamiento de inhibidores del RHA (4,7-PHE y ANF), o con inhibidor de la vía de Smad (SB431542). Nuestros resultados mostraron que el pesticida (0.05 µM) induce la activación de Smad3 y p38 a los 5 y 15 min (p<0.05), así como de ERK1/2 a los 15 y 30 min (p<0.05). Por otro lado, el HCB estimula la fosforilación de Smad3 a los 5 min a dosis de 0.005 y 0.05 µM (p< 0.05), así como de ERK1/2 a dosis de 0.05, 0.5 y 5 µM (p<0.05; p<0.01 y p<0.01) a los 15 min. El incremento en la migración celular promovido por HCB (5 µM) (p<0.01) fue bloqueado por inhibidores del RHA (p<0.001) y de la vía de Smad (p<0.05). El HCB activa las vías de señalización de Smad3, p38 y ERK1/2 del TGF-β1 en la línea celular de cáncer de mama humano MDA-MB-231. El incremento inducido por el pesticida en la migración celular depende del RHA y de la vía de Smad del TGF-β1.