Improvement of bovine semen quality by removal of membrane-damaged sperm cells with DNA aptamers and magnetic nanoparticles.

FARINI VERONICA; CAMAÑO CARLA; GABRIEL YBARRA; DIEGO L VIALE; VICHERA GABRIEL; JUAN SEBASTIAN YAKISICH; MARTÍN RADRIZZANI

Buenos Aires

Congreso; Nano 2016: XIV Encuentro de superficies y materiales nanoestructurados; 2016

INTI

En el ganado Bovino la criopreservación de semen y semen sexado puede matarhasta el 50 % de espermatozoides y disminuye el éxito de la inseminaciónasistida (AI). Por lo tanto, es importante mejorar la calidad del semen antes dela IA. En este trabajo se utilizó la técnica de Cell-SELEX(1) para seleccionaraptámeros de una sola hebra de ADN capaces de reconocer con alta afinidad yespecificidad las membranas plasmáticas dañadas de los espermatozoides. Dela selección, aislamos aptámeros con dos motivos conservados de 6 nucleótidosde longitud cada uno y que se unen a la membrana de los espermatozoides tratados. Luego, utilizamos los aptámeros de ADN sintético conjugados conbiotina para separar células viables mediante nanopartículas. Las nanoparticulas de óxido de hierro superparamagnético (SPION) fueron sintetizadas por la técnica de Stober(2) modificada, La nanoparticulas de hierro fueron englobadas con tetraetil ortosilicato (TEOS) y recubiertas con 3-aminopropil-trietoxisilano (APTES) para conjugar la Avidina en su superficie. Las nanoparticulas de 130 nm fueron utilizadas para separar los espermatozoides sanos de aquellos dañados.