Optimización de un medio de cultivo para la producción de Cry1Ac producida por el aislamiento nativo Bacillus thuringiensis RT

MENTEL, ISABEL; BAIGORI, MARIO DOMINGO; PERA, LICIA MARÍA

Rosario

Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología, XIV Congreso Argentino de Microbiología,; 2016

Asociación Argentina de Microbiología

Bacillus thuringiensis (Bt) es una bacteria GRAM positiva que posee la característica de formar esporas de resistencia y proteínas cristales  insecticidas  denominadas  delta  endotoxinas  (Cry).  Dichas  proteínas  son  ampliamente  utilizadas  para  controlar  Spodoptera  frugiperda  (Lepidoptera: Noctuidae), plaga clave del maíz en el NOA. El uso de formulados a base de Bt representa una alternativa importante para el  control de insectos plagas. A los efectos, de obtener un producto eficiente y de bajo costo se debe tener en cuenta que los avances en la  producción de bioinsecticidas dependen de la aplicación de tecnologías de fermentación adecuadas, principalmente en lo que se refiere al  diseño de medios de cultivo. El objetivo de este trabajo es optimizar un medio de cultivo complejo para obtener una mayor producción de  Cry1Ac. Para realizar este estudio, se utilizó un aislamiento nativo Bt RT (Genebank: EF638795 16S partial sequence) y un diseño factorial de dos  niveles. Las variables de entrada analizadas fueron: concentración de suero lácteo, harina de soja y almidón; la variable respuesta de interés fue  la concentración de proteína Cry1Ac. Las variables independientes fueron seleccionadas previamente mediante el diseño factorial Plackett ‐  Burman. La cuantificación de la proteína Cry1Ac se realizó por el método de elución del colorante Coomassie Blue R250 de la banda en estudio  separada por SDS‐PAGE (Cry1Ac: gi|685425906. Rf: 0,19 ± 0,01) usando suero albúmina bovina como estándar. El estudio demostró que la  harina de soja (E= ‐0,009060; p= 0,003), el suero lácteo (E= ‐0,013810; p