Efecto de la proteína X del virus hepatitis B (HBV) sobre MDR1, MRP1 y BCRP: potenciales nuevas implicancias en la hepatitis B crónica, la oncogénesis viral y la terapéutica

CUESTAS, ML; CASTILLO, AI; GENTILE, EA; DELFINO, MC; OUBIÑA, JR; MATHET, V.

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2013

SAIC

EFECTO DE LA PROTEÍNA X DEL VIRUS HEPATITIS B (HBV) SOBRE MDR1, MRP1 Y BCRP: POTENCIALES NUEVAS IMPLICANCIAS EN LA HEPATITIS B CRÓNICA, LA ONCOGÉNESIS VIRAL Y LA TERAPÉUTICA   María L. Cuestas1,2, Amalia I. Castillo1,2, Emiliano A. Gentile1,2, Cecilia Delfino1,2,José R. Oubiña1,2, Verónica L. Mathet 1,2. 1 Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica (IMPAM, UBA-CONICET), Facultad de Medicina, UBA, Argentina; 2 CONICET, Argentina. Introducción. El carcinoma hepatocelular (HCC) representa el 4% de los tumores de todo el mundo y la quinta causa de cáncer en el hombre. Cerca del 80% de los pacientes con HCC se encuentra crónicamente infectado con el virus Hepatitis B (HBV).La proteína X del HBV desempeña un rol principal en la oncogénesis hepática, y su triple mutante (I127T/ K130M /V131I) exhibe una actividad transactivadora  mayor que la  salvaje, contribuyendo significativamente a la hepatocarcinogénesis. Las proteínas ABC son bombas transmembrana que transportan sustratos en contra del gradiente de concentración. La sobreexpresión de algunos de sus miembros- como MDR1, MRP1 y BCRP- está asociada a la resistencia a múltiples drogas. La sobreexpresión de algunos de estos miembros (MDR1 y MRP1) está asimismo asociada con la inhibición de la vía intrínseca de la apoptosis y el cáncer. Objetivo. Analizar el efecto de la expresión de la proteína X salvaje (Xsal) y de la triple mutante (Xmut) del HBV sobre los niveles de ARNm de mdr1, mrp1 y bcrp,  así como sobre los niveles de expresión de las proteínas homónimas.  Diseño del Estudio. La línea celular Huh7 fue transfectada con plásmidos que codifican para la proteína Xsal o Xmut del HBV. Al cabo de 24 y 72 h. de expresión transitoria, los niveles de ARNm y de proteína de los genes mdr1, mrp1 y bcrp fueron evaluados mediante RT-qPCR y Western Blot, respectivamente. Resultados. Se observó: (i) un aumento estadísticamente significativo en los niveles de expresión de BCRP ?medidos por Western Blot- en aquellos cultivos que expresaron Xsal por 24 y 72h, así como en los que expresaron Xmut por 72h; y (ii) un aumento estadísticamente significativo en los niveles de la proteína MRP1 en las células Huh7 luego de 24h de expresión de Xmut. Conclusiones: Dichos hallazgos ameritan su análisis ex vivo para evaluar las potenciales nuevas implicancias ?al menos de bcrp y mrp1- en la hepatitis B crónica, la oncogénesis hepática y en el tratamiento del HCC.