Efecto de la proteína X del virus hepatitis B (HBV) en la carcinogénesis hepática

CUESTAS, ML; CASTILLO, AI; CASTRONUOVO, CC; DELFINO, MC; GENTILE, EA; OUBIÑA, JR; MATHET, V.

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2013

SAIC

EFECTO DE LA PROTEÍNA X DEL VIRUS HEPATITIS B (HBV) EN LA CARCINOGÉNESIS HEPÁTICA   María L. Cuestas, 1,2 Amalia Castillo, 1,2 Cynthia C. Castronuovo, 1,2 Cecilia Delfino, 1,2 Emiliano Gentile, 1,2 José R. Oubiña,1,2 Verónica L. Mathet 1,2 1Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica (IMPAM, UBA-CONICET), Facultad de Medicina, UBA, Argentina. 2CONICET, Argentina. Introducción. El carcinoma hepatocelular (HCC) representa el 70-85% de los tumores malignos hepáticos en el mundo. La infección crónica por el virus hepatitis B (HBV) contribuye con más de un 75% a los casos de HCC. La proteína X del HBV desempeña un rol principal en la oncogénesis hepática. La triple mutante de X I127T/K130M/V131I exhibe una actividad transactivadora  mayor que la salvaje, contribuyendo significativamente a la hepatocarcinogénesis. Objetivo. Estudiar los efectos de la proteína X salvaje (Xsal) y de la triple mutante (Xmut) del HBV sobre los niveles expresión de diversos genes involucrados en la apoptosis, proliferación e inmortalización celular. Diseño del Estudio. La línea celular Huh7 fue transfectada con plásmidos que codifican Xsal y Xmut del HBV. Al cabo de 24 y 72 h. de expresión transitoria, los niveles de ARNm de bax, bcl-2 y h-Tert fueron evaluados mediante una RT-PCR-Multiplex semicuantitativa, mientras que la expresión de las proteínas c-Myc, c-IAP1 y 2, caspasas 3 y 9, tanquirasa y ganquirina se estudiaron mediante Western Blot. Todos los resultados fueron comparados con los obtenidos en la línea celular HepG2.2.15, establemente transfectada con el replicón del HBV. Resultados. Altos niveles de expresión de Xsal y Xmut (24 h. post-transfección) aumentan la expresión de los genes anti-apoptóticos bcl-2, c-IAP1, c-IAP2 y ganquirina Bajos niveles de expresión de Xsal y Xmut (72 h. post-transfección) disminuyen la expresión de algunos de estos genes anti-apoptóticos y  no poseen efecto significativo sobre los restantes. La relación entre los ARNm de bcl-2/bax estuvo incrementada a las 24 h. pero fue igual al control a las 72 h post-transfección. Conclusiones. Niveles elevados de X -independientemente de su naturaleza salvaje o mutada- inhibirían la apoptosis mientras que bajos niveles de esta proteína la promoverían. Los resultados observados con Xsal y Xmut a altas concentraciones se correlacionan con los obtenidos en las células HepG2.2.15.