Transformación estable de alfalfa (Medicago sativa) empleando micropartículas aceleradas

JUAN PABLO AMELIO ORTIZ; REGGIARDO, MI; SPITTELER, MA; VALLEJOS, RH

Anales Asociación Química Argentina

Asociación Química Argentina

Lugar: Buenos Aires; Año: 1992 vol. 80 p. 159 - 166

Se informa la transformación estable de alfalfa empleando micropartículas aceleradas recubiertas con distintos plásmidos. Las condiciones experimentales de bombardeo fueron optimizadas mediante el análisis de la expresión transiente del gen de la beta-glucuronidasa en células de alfalfa. Para la transformación estable se emplearon los plásmidos pGV26O y pDHBar que contienen genes que confieren resistencia a los antibióticos higromicina y kanamicina y al herbicida bialaphos. Las células bombardeadas con estos genes fueron colocadas en medio selectivo y cultivadas por 2- 3 meses. Los callos que manifestaron crecimiento fueron analizados por PCR e histoquímica cuando correspondió. Se obtuvieron varios callos positivos para ambos análisis lo que sugiere la transformación estable de los mismos. Se concluye que el acelerador de micropartículas construido y desarrollado en nuestro laboratorio es adecuado para obtener transformación estable de células vegetales y esperamos obtener plantas de alfalfa transgénicas empleando este método de transformación.