Desarrollo de un test de determinación de paternidad y parentesco para pejerrey odontesthes bonariensis utilizando marcadores microsatélites

SAPINO R; DÍAZ J ; FAGGIANI M ; MIRANDA LA; SOMOZA GM ; VILLANOBA GV ; ARRANZ S.

Piriapolis

Conferencia; Ontogenia del sistema digestivo en larvas del pejerrey (Odontesthes bonariensis,VI Conferencia Latinoamericana sobre cultivo de peces nativos; 2018

El pejerrey Odontesthesbonariensis es una especie nativa ampliamente distribuida en aguascontinentales de la región central de Argentina, y ha sido dispersado a otrospaíses del mundo. Es una especie emblemática de las pesquerías recreativas ydeportivas del centro y norte del país, generando una actividad económica muyimportante. Su piscicultura data de varias décadas, principalmente dedicada ala producción de huevos o larvas para la siembra en cuerpos de agua donde sepromueve la pesca deportiva como actividad turística. A pesar de la importanciade esta especie, la información sobre la diversidad genética de suspoblaciones, que sirva para la mejora de su producción o para evaluar elimpacto de las siembras, es escasa. La presencia de diversidad genética en unapoblación es necesaria para que esa población pueda sobrellevar los cambiosambientales, así como también es la base de los procesos evolutivos. Lasreproducciones de pejerrey con fines de siembra se realizan sin conocer elgrado de parentesco de los reproductores a ser utilizados y tampoco se evalúanlas características de la población donde serán introducidos. En este trabajose propone el desarrollo de un test de determinación de paternidad y parentescopara pejerrey basado en dos reacciones de PCR multiplex utilizando marcadoresmicrosatélites. Para ello, se pre-seleccionaron 13 marcadores microsatélitesdescriptos en la bibliografía. Las reacciones de PCR para cada locus fueronestandarizadas en el laboratorio utilizando ADN proveniente de 2 individuos,Luego 11 de los 13 marcadores fueron caracterizados en una población silvestre(N=20). Los productos de amplificación obtenidos para cada marcador fueronresueltos en geles de poliacrilamida teñidos con plata. Para cada locus sedeterminó el número de alelos (Na), heterocigocidad observada (Ho) y esperada(He), frecuencia de alelos nulos (Fnull), contenidos de información polimórfica(PIC), y probabilidad de exclusión (PE). El Na totales fue 91, y varió porlocus entre 4 y 14, la He varió entre 0,561 y 0.903, la Ho varió entre 0 y0.889, y el PIC varió entre 0.514 y 0,869. Siete de los loci presentaron Fnull< 10%. Teniendo en cuenta estos parámetros, se seleccionaron los 7 loci quepresentaron un potencial de exclusión acumulado mayor a 99 % (Pexc acum1=0,992).Éstos fueron combinados en dos PCR multiplex M1 y M2 de acuerdo a los tamañosde los fragmentos de amplificación. Los cebadores se marcaron fluorescentementey se evaluaron las condiciones de co-amplificación para cada multiplex. Luego,M1 y M2 se usaron para genotipar 3 familias (padre, madre y progenie. Ntotal=96) con el fin de validar la segregación mendeliana, el desequilibrio deligamiento y la presencia de alelos nulos de los marcadores. Esta herramientapermitirá evaluar la diversidad genética y el grado de parentesco existenteentre los reproductores de los centros de cultivo, clasificarlos de acuerdo aello y diseñar las cruzas para evitar la endogamia y la disminución dediversidad genética en las poblaciones de pejerrey en los ambientes donde se realicenlas siembras.