INVESTIGADORES
MELCHIORRE Mariana Noemi
congresos y reuniones científicas
Título:
TRANSFORMACION OPTIMIZADA DE RAÍCES DE SOJA Y EFECTOS DE LA
Autor/es:
NACIRA MUÑOZ, GERMAN ROBERT, MARIANA MELCHIORRE, RODRIGO PAROLA Y RAMIRO LASCANO
Lugar:
La Plata
Reunión:
Congreso; XXVIII Reunion Argentina de Fisiologia Vegetal; 2010
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Fisiologia Vegetal
Resumen:
Antecedentes previos del grupo de trabajo muestran que el estado redox celular es determinante
en el establecimiento de la interacción simbiótica Soja- Bradyrhizobium japonicum en presencia de
estrés salino. El objetivo del trabajo fue eficientizar la obtención de raíces en cabellera (Hairy root)
de Glycine max para la sobreexpresión de glutation reductasa (GOR) y analizar su efecto sobre la
nodulación. Las plántulas fueron infectadas con Agrobacterium rhizogenes K599 conteniendo el
plasmido pBin19 GOR-T2-GUS (kmR). El cultivo bacteriano fue previamente inducido con
acetosiringona. Dos modificaciones en la metología de infección contribuyeron a incrementar el
número y tiempo de aparición de raíces en cabellera transgénicas (T): 1)- Se realizó una escisión
en la base de los cotiledones 2)- Se adiciono al tejido vegetal expuesto en la muesca L- Cisteína
50 mM. En esta zona se inyecto con aguja subcutánea el cultivo bacteriano. Se observó gran
número de callos a los 6 días post infección y a los 8 días se observaron raíces adventicias. El
porcentaje de raíces T fue chequeado por reacción de GUS y se estableció en 50 %. 12 días post
infección las plántulas fueron colocadas en hidroponía para inducir el crecimiento de las raíces en
cabellera y evaluar los efectos de GOR sobre la nodulación. Nuestros resultados muestran que el
sistema de transformación es eficiente, estable y repetible. Corroboramos que la infección en una
muesca favorece la transformación de células del cambium del tallo, incrementándose el número
de células de este tipo en contacto con Agrobacterium rhizogenes y, los callos que se desarrollan
quedan directamente expuestos para la formación de raíces. La longitud total de raíces que
sobreexpresan GOR no mostró diferencias significativas respecto de raíces no transgénicas (NT),
aunque se observaron cambios en la longitud de raíces laterales. Asimismo el número de nódulos
en raíces T cayó en un 50 % respecto de raíces NT. La alteración del estado redox celular afecta
significativamente la interacción simbiontica.
