Celulas persistentemente infectadas con HIV-1: efecto de la Curcumina, como agente inmunomodulador, en combinacion con un agente antirretroviral.

D. RIVA, C. ESPADA, E. GERHARDT, G. DOLCINI, L. MARTINEZ PERALTA, F. COULOMBIE , S.E. MERSICH.

Vaquerías, Valle Hermoso, Córdoba, 2-5 de Diciembre de 2007.

Jornada; XXVII Reunion Cientifica Anual de la Sociedad Argentina de Virologia.; 2007

Sociedad Argentina de Virología.

La existencia de reservorios de células infectadas con el virus HIV-1 es uno de los mayores inconvenientes que existen para la erradicación de la infección. El uso de drogas antirretrovirales no ha logrado eliminar la replicación viral y además ha sido asociado a efectos adversos, como cardiopatías y lipodistrofia, relacionados con el estrés oxidativo. Una de las metas actuales es la búsqueda de nuevas combinaciones terapéuticas que eliminen tanto la replicación residual como los efectos indeseados, utilizando menores concentraciones de las drogas en uso. En este contexto, la combinación de las terapias actuales con agentes que regulen la activación de factores de transcripción relacionados con el estrés, como NF-kappa B, podría ser útil. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la acción de la Curcumina (Cur), conocido agente inmunomodulador y antioxidante, sobre la modulación de la infección en dos líneas celulares persistentemente infectadas con HIV-1, en combinación con el inhibidor de proteasa Indinavir (IDV, antiviral con conocidas propiedades prooxidativas sobre diversas células). Para ello, células H9/HTLVIIIB (H9+) y U1, de origen linfocítico y monocítico respectivamente, así como sus respectivos controles sin infectar (H9 y U937) se incubaron, durante 24 h en medio de mantenimiento, en presencia de Cur o una combinación de Cur con IDV. Luego, se determinaron distintos parámetros sobre las células y sobrenadantes celulares: (a) citotoxicidad de los compuestos utilizados, mediante la tinción con azul trypan y MTT; (b) proteína viral (p24) liberada al medio extracelular, mediante un elisa comercial (Vironostika); (c) infectividad viral (solamente en sobrenadante de H9+), mediante el uso de células indicadoras CD4-LTR/B-gal, e infectividad relativa, cociente de infectividad sobre p24; (d) actividad de superóxido dismutasas totales presente en las células, como indicador de estrés oxidativo; y (e) degradación de I-kappa B, como indicador de activación de NF-kappa B, por medio de western blot, luego de una activación con TNF. Todos los experimentos presentados se realizaron en condiciones no citotóxicas, según lo determinado en (a).El tratamiento de las células H9+ con la máxima concentración utilizada de Cur (10 microM) determinó cambios no significativos en (b), una disminución de 36% en (c) y una reducción de los niveles de (d), respecto de los cultivos control. En cuanto a la combinación de Cur con IDV 10 y 50 microM, se determinó una reducción significativa en la infectividad relativa para ambas concentraciones. El tratamiento de las células U1, en iguales condiciones, provocó un aumento significativo en (b) y una reducción en (d). Cuando se estudió la vía de activación de NF-kappa B, se observó que Cur o la combinación de Cur con IDV aumenta (e) en ambas líneas celulares infectadas. En resumen, los efectos de Cur con respecto a la producción de p24 dependen del linaje celular estudiado. Además, la infectividad relativa en los sobrenadantes de H9+ demuestra que Cur podría usarse para disminuir la concentración de IDV. El análisis de los parámetros de estrés revela que la presencia de Cur, en combinación con IDV, restituye SOD a los valores del control. Sin embargo, la degradación de Ikappa-B por parte de Cur, de manera dosis dependiente, puede indicar un efecto prooxidativo, si se utilizan elevadas concentraciones del compuesto. En conclusión, Cur modula la activación de NF-kappa B en las dos líneas infectadas analizadas, con una importante liberación de HIV solo en la línea monocítica.