Efecto del 17 alfa ethynil estradiol en la distribución de aquaporina 8 en microdominios de membrana en células hepáticas.

LAROCCA, MC, FLAVIA I. CARRERAS, RAÚL A. MARINELLI

Buenos Aires

Congreso; XII Reunión Latinoamericana de Ciencias Fisiológicas; 2006

Sociedad Argentina de Fisiología

Efecto del  17 a etinil estradiol (EE) sobre localización de aquaporina 8 (AQP8) en microdominios de membranas en células hepáticas. M. Cecilia Larocca, Flavia I. Carreras, Raúl A. Marinelli, Inst. de Fisiol. Exp., Fac. Cs. Bioq. Farm., Univ. Nac. Rosario-CONICET.   Los hepatocitos son células epiteliales responsables de la secreción biliar canalicular. El transporte de agua a través de la membrana canalicular tiene lugar a favor del gradiente osmótico generado en forma activa por transportadores de solutos, y es facilitado por AQP8. Nuestros resultados indican que durante la colestasis inducida por EE disminuye la expresión hepática de AQP8 por aumento en su degradación lisosomal. En membrana canalicular, AQP8 se localiza parcialmente en microdominios enriquecidos en colesterol y esfingolípidos (rafts). Objetivo: estudiar si EE altera la distribución de AQP8 en rafts en células hepáticas. Metodología: el efecto de EE se analizó en un subclon de células HepG2 (C3A) y en hígados de ratas tratadas con dosis colestásicas de EE (5 mg/kg p.c., 5 días). Estudios de PCR, Western blot e inmunofluorescencia indican que C3A conserva la expresión y localización subcelular de AQP8 descripta en hepatocitos de rata. La distribución de AQP8 en rafts se determinó analizando por Western blot su expresión en fracciones de membrana solubles o insolubles (rafts) en Tritón X-100 1%. Resultados: EE 10 mM indujo una disminución en la formación de pseudocanalículos en células C3A a las 24 y 48 h. Luego de 72 h de incubación EE indujo una disminución en los niveles de AQP8 en membrana plasmática (EE -25%, n 3, p