Tc323: Una nueva proteína de Trypanosoma cruzi como potencial marcador de diagnóstico de la Enfermedad de Chagas.

MICAELA S. OSSOWSKI; GALLARDO, JUAN P.; FERNANDEZ, MARISA; HERNÁNDEZ-VÁSQUEZ, YOLANDA; CHADI, RAUL; GOMEZ, KARINA A

Buenos Aires

Congreso; XXXIII Reunión de la Sociedad Argentina de Protozoología (SAP); 2022

Sociedad Argentina de Protozoología (SAP)

La enfermedad de Chagas (EC) es una zoonosis potencialmente mortal causada por el parásito Trypanosoma cruzi. El diagnóstico de la EC crónica (EChc), según recomendación de la Organización Mundial de la Salud, requiere el uso de al menos tres métodos serológicos. Sinembargo, ninguno de ellos presenta 100% de sensibilidad y especificidad, lo que impulsa a labúsqueda de pruebas más específicas y sensibles. Con base en lo expuesto, nuestro objetivo fue evaluar la utilidad diagnóstica de una proteína hipotética de T. cruzi, denominada Tc323. Esta proteína de 323 kDa está altamente conservada a lo largo de su evolución en todo el linaje de T. cruzi, pero carece de ortólogos en otros parásitos kinetoplástidos. Debido a las limitaciones experimentales para obtener el antígeno de longitud completa se hizo la predicción, mediante el servidor web RaptorX, de seis dominios estructurales (D1-D6) que se expresaron en células E. coli BL21(DE3) Rosetta. Paralelamente, utilizando el programa BepiPred 2.0, se determinó que en D4 y D6 se encontraban la mayoría de las secuencias antigénicas. Por lo tanto, posterior a la optimización del ELISA indirecto, evaluamos el rendimiento de estos antígenos en la detección de anticuerpos contra T. cruzi utilizando el plasma de donantes con EChc e individuos no infectados. Los parámetros de rendimiento (AUC, sensibilidad, especificidad, precisión e índice J) mostraron una alta precisión diagnóstica para ambos antígenos sugiriendo que ambas proteínas tienen una elevada capacidad de discriminación entre muestras seropositivas y seronegativas. Además, se utilizó un total de 38 plasmas adicionales para probar la reactividad cruzada con enfermedades norelacionadas. Las tasas de reactividad cruzadafueron muy bajas incluso para Leishmania spp. Por lo tanto, nuestro hallazgo permite posicionara Tc323 como un prometedor candidato inmunodiagnóstico de la EChc.