INVESTIGADORES
GOLDMAN Alejandra
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto de la optimización de codones y de la localización subcelular en la expresión del antígeno SAG1 de Toxoplasma gondii en hojas de tabaco y análisis de la inmunogenicidad en ratones.
Autor/es:
LAGUÍA BECHER, M.; MARTIN, V.; GOLDMAN, A.; CORIGLIANO, M.; CLEMENTE, M
Lugar:
Rosario
Reunión:
Simposio; VII Simposio nacional de biotecnologia REDBIO-Argentina- II Congreso Internacional-REDBIO-Argentina; 2009
Resumen:
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En este trabajo se analizó el efecto de la
optimización de codones y la localización subcelular sobre la expresión
transiente del antígeno SAG178-322 de Toxoplasma gondii en hojas de tabaco. Además, se realizaron
inmunizaciones intraperitoneal y subucutánea en ratones con extractos vegetales
expresando dicho antígeno. Se adecuó la secuencia de SAG178-322 al
uso de codones de Nicotiana tabacum y
se obtuvieron versiones que permitirían la acumulación de la proteína en el
retículo endoplásmico o en el apoplasto. La modificación de 58 nucléotidos de
la secuencia que codifica para la proteína SAG178-322 no mejoró la
expresión de la misma. Por otro lado, los niveles de expresión de la versión
nativa permite la retención de SAG178-322 en el RE fue mayor que las
versiones que envían la proteína al apoplasto. Sin embargo, la acumulación del
ARNm fue mayor para la versión vegetalizada
de retención al RE. En cuanto a los ensayos de inmunización, los ratones
inmunizados intraperitonealmente con los extractos vegetales expresando SAG178-322
combinado o no con otro antígeno
de T. gondii (GRA4) también expresado
en plantas mostraron una reducción significativa de la carga parasitaria
cerebral comparada con el grupo control pese a que no se evidenció la
generación de una respuesta humoral específica. Sin embargo, en las
inmunizaciones subcutáneas con extracto expresando SAG178-322, donde
también se había observado inmunoprotección y respuesta humoral, se observó un
aumento significativo en el test de hipersensibilidad retardada (DTH) en el
grupo inmunizado, sugiriendo la generación de una respuesta celular específica.