Análisis del valor inmunoprotectivo de antígenos de Toxoplasma gondii expresados en plantas.

MARTIN V,; GOLDMAN A; LAGUIA-BECHER M; CLEMENTE M

Rosario, Argentina

Congreso; 8vo Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2008

La mayoría de los antígenos recombinantes que se emplean en vacunas son producidos en bacterias. Sin embargo, por las grandes diferencias existentes entre los sistemas procariotas y eucariotas, estas proteínas difícilmente se recuperan en estados conformacionales y con las modificaciones postraduccionales apropiados. Así, en algunos casos se han ensayado sistemas eucariotas para la producción de estas proteínas. En particular, el uso de las plantas para producir vacunas para humanos y animales despertó gran interés en los últimos años. Es de destacar que la producción de vacunas en plantas es atractiva no sólo en términos de costos sino también en términos de seguridad.  En el presente trabajo se expresaron en hojas de tabaco los antígenos de T. gondii candidatos para el desarrollo de vacunas SAG1 y GRA4 y se inmunizaron ratones C3H con extractos de hojas expresando cada una de estas proteínas por separado o ambas. Al día 0 se inmunizaron intraperitonealmente, ratones hembras de 6-8 semanas de edad con las proteínas totales solubles (PTS) extraídas de hojas de tabaco expresando SAG1 o GRA4 o ambas (conteniendo el equivalente de aproximadamente 200 ng de cada una de las proteínas recombinantes). Los extractos se emulsionaron con adyuvante de Freund completo (V/V 1:1). Luego, se realizaron tres boosters con los mismos extractos (SAG1, GRA4 o ambas) suplementado con adyuvante de Freund incompleto  administrándose a intervalos de 14 días (d 14, 28 y 42). El desafío se realizó oralmente usando 20 quistes de la cepa M49 de T. gondii al día 56. Los animales control se inmunizaron con PTS de hojas de tabaco infiltradas con el vector sin inserto más el adyuvante de Freund. A las 4 semanas luego del desafío los ratones se sacrificaron y se removieron los cerebros para el conteo de quistes. Nuestros resultados mostraron que los ratones inmunizados con los extractos expresando cada uno de los antígenos o una mezcla de ambos presentaban un número significativamente menor de quistes que los ratones control sugiriendo que tanto SAG1 como GRA4 retienen la estructura para despertar una respuesta inmunológica en los ratones inmunizados. Estos resultados alientan la idea de que una expresión conjunta de ambos antígenos podría proveer una excelente oportunidad para explorar la aplicación de una vacuna oral contra la toxoplasmosis.