Evaluación de extractos etanólicos de Arachis hypogaea L. en su potencial citotóxico y antiviral frente al virus dengue

MENIS CANDELA, F., SUÁREZ PERRONE, A., SABINI, M.C., GIORDANO, W.

Bahía Blanca

Jornada; XVII Jornadas Argentinas de Microbiología; 2017

El virus dengue (flia. Flaviviridae) es un patógeno emergente que infecta a 50-100 millones de personas cada año en todo el mundo y provoca fiebre del dengue, fiebre hemorrágica del dengue y síndrome de shock por dengue. No hay medicamentos antivirales efectivos para el tratamiento de estas afecciones. El maní (Arachis hypogaea L.) es una leguminosa que presenta numerosas propiedades medicinales tales como antioxidante, antiviral. El objetivo del presente trabajo fue evaluar los extractos etanólicos de Arachis hypogaea L. en su capacidad citotóxica y antiviral durante todo el ciclo de replicación del virus dengue. Para ello, se obtuvieron extractos etanólicos de semillas (EES) y de tegumento (EET) de maní por un método de extracción alcohólico simple. Estudios de citotoxicidad: monocapas de células Vero fueron tratadas con concentraciones crecientes (0-1600 µg/ml) de EES y EET. La citotoxicidad se determinó a los 7 días de incubación por: Máxima Concentración No Citotóxica (MCNC), Captación del Rojo Neutro (RN) y Reducción de MTT. Actividad antiviral en todo el ciclo de replicación: se evaluó por el método de reducción de placas de lisis. Monocapas de células Vero fueron infectadas con 100 UFP/pocillo de virus y tratadas con dos concentraciones no citotóxicas de cada extracto, EET a 10 y 60 µg/ml y EES a 100 y 600 µg/ml, el sistema se incubó 1 h a 37ºC para permitir la adsorción y penetración viral. Posteriormente, se descartó el inóculo y se adicionó medio para placas conteniendo extracto a las mismas concentraciones que en la etapa anterior y se incubó a 37ºC por 7 días. Se incluyeron controles virales, celulares y de inocuidad del extracto. Luego, se fijaron las células con formaldehido (10%) y se tiñeron con cristal violeta (1%). Se contaron las placas de lisis y se calcularon los porcentajes de inhibición viral.Los resultados de citotoxicidad indicaron un valor de MCNC de 75 µg/ml para EET y de 1200 µg/ml para EES. Mientras que, los valores de CC50 fueron de 65 µg/ml (MTT) y 169 µg/ml (RN) para EET y de 636 µg/ml (MTT) y >1400 µg/ml (RN) para EES. El EES resultó menos tóxico que EET por todos los métodos evaluados. Por otra parte, los estudios de inhibición viral durante todo el ciclo de replicación indicaron porcentajes de 72,5% (10 µg/ml) y 100% (60 µg/ml) para EET y de 0% (100 µg/ml) y 29% (600 µg/ml) para EES. Se concluye que el EET de Arachis hypogaea L inhibió al virus dengue durante todo el ciclo de replicación viral a concentraciones no tóxicas para las células. Futuros estudios serán necesarios para dilucidar el blanco de acción del extracto activo.