Aislamiento y caracterización de microsatélites en Oligoryzomys longicaudatus (Cricetidae, Oryzomini), el reservorio natural del Hantavirus genotipo Andes.

GONZÁLEZ-ITTIG R. E., SALAZAR-BRAVO J., POLOP J.J. Y GARDENAL C. N.

Villa Giardino, Córdoba

Congreso; XXII Jornadas Argentinas de Mastozoología; 2008

El roedor Oligoryzomys longicaudatus es el reservorio del agente etiológico del Síndrome Pulmonar por Hantavirus en el sur de Argentina y Chile. En un estudio previo se determinó que en bosques y arbustales de la localidad de Cholila (Chubut), O. longicaudatus alcanza altos niveles de abundancia. En el arbustal, los mayores valores se registraron en otoño-invierno, mientras que en el bosque los picos de densidad se asociaron al verano-otoño. Dada la proximidad geográfica de ambos ambientes, surgió la necesidad de desarrollar microsatélites para realizar un estudio microgeográfico de estructura genética poblacional y establecer si los animales pertenecen a una misma población que se traslada del bosque al arbustal en diferentes épocas del año o si corresponden a poblaciones distintas. Para el desarrollo de microsatélites se procedió a extraer ADN total, digerirlo con enzimas de restricción y añadirle oligonucleótidos adaptadores, luego de lo cual fueron enriquecidos con microsatélites a través de una hibridación de ADN-oligonucleótidos marcados con biotina, eventualmente capturados con perlas magnéticas recubiertas con estreptavidina. Este ADN enriquecido fue amplificado, ligado a un plásmido e incorporado a células competentes. De los 52 clones seleccionados, 15 presentaron microsatélites únicos. Se diseñaron los cebadores para esos loci y se evaluó si amplificaban. Se determinó el polimorfismo de los loci utilizando 42 animales de O. longicaudatus provenientes de El Bolsón, Cholila, Junín de los Andes (Argentina) y El Prado (Chile). Once microsatélites revelaron de 4 a 21 alelos/locus y valores de heterocigosis de 0.371-0.896. Tres loci presentaron desequilibrio por ligamiento y en uno de ellos se detectaron alelos nulos; 8 cebadores serán útiles para el estudio microgeográfico. Los once cebadores también se examinaron en O. chacoensis, O. flavescens, O. nigripes, O. destructor, Pseudoryzomys simplex y Holochilus chacarius; algunos de ellos podrían utilizarse para futuros estudios genético-poblacionales en estas especies.