Identificación de subpoblaciones de Aedes aegypti mediante un fragmento hipervariable de la región ?control? del ADN mitocondrial.

ALBRIEU LLINAS, G.; RONDAN DUEÑAS, J.C.; GARDENAL, C.N.

La Plata

Congreso; 5º Jornadas Regionales sobre Mosquitos; 2007

En el presente trabajo se planteó como objetivo determinar la utilidad de un fragmento de aproximadamente 420 pb de la región control (rica en A+T) del ADN mitocondrial de Aedes aegypti (Diptera, Culicidae), como marcador molecular para analizar la estructura poblacional a escalas geográficas pequeñas. La complejidad estructural de dicha región llevó al desarrollo de estrategias particulares para su amplificación por PCR, clonado y posterior secuenciación. Con el propósito de analizar el grado de variabilidad a nivel de secuencia nucleotídica de dicho fragmento, se compararon individuos de poblaciones argentinas y de una población de Brasil. Las secuencias obtenidas presentaron polimorfismo a dos niveles. Por un lado, se observaron marcadas diferencias en la longitud total del fragmento, debidas fundamentalmente a una gran deleción que abarca entre 106 y 143 pb. Esta característica podría convertirla en un carácter distintivo entre poblaciones y entre individuos. Por otro lado, las secuencias analizadas mostraron un grado de diferenciación nucleotídica (mutaciones puntuales) en una proporción que osciló entre el 3 y el 7 %, lo cual permitió discriminar 10 haplotipos diferentes en un total de 12 individuos analizados. De esta manera, se pudieron reconocer nuevas variantes dentro de poblaciones que aparecían homogéneas en su constitución de haplotipos previamente descriptos mediante RFLP-PCR. En base a su identidad genética estas secuencias se agruparon, en algunos casos, según el origen geográfico de las muestras o bien presentaron una similitud que podría explicarse por transporte pasivo a través de rutas comerciales importantes. La región del ADN mitocondrial analizada en este trabajo constituye un marcador molecular de gran utilidad para caracterizar subpoblaciones geográficamente próximas de Ae. aegypti.   Palabras clave: Aedes aegypti, ADN mitocondrial, haplotipos