AISLAMIENTO Y RESÍNTESIS DE ENDÓFITOS SEPTADOS OSCUROS DISPERSADOS EN HECES DE Ctenomys knigthi (RODENTIA)

MIRANDA VICTORIA; CARRASCO FRANCA; FRACCHIA SEBASTIÁN

Buenos Aires

Congreso; III Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental; 2015

AAM

AISLAMIENTO Y RESÍNTESIS DE ENDÓFITOS SEPTADOS OSCUROS DISPERSADOS ENHECES DE Ctenomys knigthi (RODENTIA)Miranda V1, Carrasco F2, Fracchia S11CRILAR-CONICET, 2INTA EEA Catamarca. Email: carrasco.franca@inta.gob.arEl ecosistema del Desierto del Monte en Argentina es el hábitat natural de varias especies deroedores subterráneos del género Ctenomys. La dieta de estos roedores incluye raíces de especiesautóctonas del Monte, las cuales están colonizadas por distintos tipos de hongos endófitos comoGlomeromycetes y Ascomycetes. En el análisis de la materia fecal de una especie de este género seencontraron fragmentos de raíces colonizados por estos hongos endófitos, en mayor proporción porparte de endófitos septados oscuros (ESO), que permanecieron viables y con capacidad de infectarnuevas raíces de plantas hospedantes. Si bien el rol de los hongos Glomeromycota está bienestudiado en los distintos biomas, el grupo de los ESO plantea aún muchos interrogantes, ya que esun grupo polifilético con una gran diversidad taxonómica y por ende una diversidad funcionalrespecto al efecto como hongos endófitos sobre el vegetal. Se ha planteado en distintasinvestigaciones el potencial efecto mitigador de cepas de este grupo, asociadas al estrés hídrico,nutricional, térmico, etc. El conocimiento de las funciones biológicas y ecológicas de los ESO yparticularmente de los efectos que tienen estos hongos en las plantas del desierto es muy escaso. Elobjetivo de este trabajo se centra en el aislamiento de cepas de endófitos septados oscuros presentesen heces de Ctenomys knigthi, su resíntesis en especies autóctonas para caracterizar la colonizaciónde las raíces, conocer la identidad taxonómica de los aislamientos y discutir el rol de estos hongosen el ambiente desértico del Monte.Metodología: Las muestras de heces de Ctenomys (28 en total)se obtuvieron por trampeo de individuos y posterior recolección de heces o por tamizado de tierrade cuevas activas del roedor. Para el aislamiento de hongos endófitos, se utilizó un sistema deplantas trampa, donde se inoculan las heces en condiciones axénicas. A las 5-6 semanas se extraenlas raíces y se procede al aislamiento de estos hongos utilizando medios agarizados específicos apartir de fragmentos seccionados y esterilizados superficialmente. Las cepas fúngicas aisladas sonconservadas en un banco de germoplasma. La resíntesis se realizó en macetas de 300ml, con arenaesterilizada en autoclave dos veces. Para la inoculación de los hongos se utilizaron cultivos puros encaja de petri, los cuales fueron agregados en secciones de agar con micelio a las macetas ymezclados con el sustrato estéril. Como hospedantes se usaron las especies nativas Acacia aroma yTagetes minuta. Se esterilizaron superficialmente las semillas con hipoclorito de sodio al 10%, y sesembraron en las macetas. Las plantas se colocaron en un invernadero en condiciones de luz ytemperatura adecuada y al cabo de unos 30-45 días, se extrajo la raíz y se realizó una tinción dualpara la caracterización de la colonización radical.Resultados: Se aislaron 121 cepas de endófitos conlos siguientes porcentajes: 20% pertenecen al género Penicillium, 7.5% a Fusarium, 6.6% aAspergillius, 9.1% a Trichoderma, 3.3% pertenecen a Cilindrocarpom, 5% a Alternaria, 12.1%fueron cepas no identificadas (micelio estéril) y 36.4% fueron cepas de endófitos septados oscuros.De este 36.4% de ESO, se identificaron morfológicamente 28 cepas de hongos pertenecientes algénero Zopfiella (Sordariales-Lasiosphaeriaceae).En cuanto a la resíntesis, de las 22 cepas delgénero Zopfiella que se probaron, el 41% de estas son endófitas y colonizaron abundantemente lasraíces de A. aroma, mientras que el 64% de estas cepas colonizaron plantas de T. minuta.Actualmente se está llevando a cabo su identificación molecular y se está evaluando las capacidadesde estos ESO como potenciales mitigadores de condiciones de estrés en plántulas de especiesnativas.