Biosíntesis de tirosinasas y L-DOPA a partir de aislamientos fúngicos nativos de la reserva La Florida (Tucumán, Argentina)

PERALTA MP; LECHNER BE; FARIÑA JI

Mendoza

Congreso; II Reunión Científica de la Asociación Micológica Carlos Spegazzini; 2017

AMCS & SAB

En este trabajo se evaluó lacapacidad de hongos filamentosos aislados de la reserva La Florida (Tucumán-Argentina) para la síntesis de tirosinasa (TYR) y L-Dopa. Se realizó un screening preliminar para seleccionar organismos hiperproductores de TYRs, mediante un método cualitativo de revelado en placas utilizando sustratos específicos. De 80 hongos evaluados 4 resultaron positivos para los 4 sustratos ensayados: LF 1.18, LF 1.30, LF 1.47 y LF 2.11. Estos fueron luego evaluados en dos medios de producción: Czapek-Dox Agar (CDA), para determinar la producción TYRs basales y Czapek-Dox Agar Enriquecido (ECA, ídem a CDA suplementado con CuSO4·5H2O 0,004% p/v y L-tirosina 2% p/v). Para cada condición de cultivo se obtuvieron dos extractos crudos: un lisado celular resultante de la homogeneización con BeadBeater y un exudado resultante de dos etapas de congelamiento-descongelamiento. Con ambos se llevó a cabo la determinación cuantitativa de actividades mono- y difenolasa de la enzima TYR, mediante el método del Dopacromo. Posteriormente los hongos fueron comparados según su capacidadpara sintetizar L-Dopa en cultivo sumergido. El aislamiento LF 1.30 fue el más promisorio, teniendo en cuenta los títulos de L-Dopa (38,54 mg/L) y los valores de actividad TYR mono- y difenolasa (5,71 UE/L y 6,18 UE/L, respectivamente) a las 48 h de cultivo.