Posible participaci¨®n del factor inducible por hipoxia tipo 1 a (HIF-1a) en la regulaci¨®n de AQP9 en placenta humana

FARINA MARIANA, ABAD CILIA, MARINO GABRIELA, FRANCHI ANA, IBARRA CRISTINA, DAMIANO ALICIA E.

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XX Reuni¨®n de la Asociaci¨®n Latinoamericana de Investigaci¨®n en Reproducci¨®n Humana (XX ALIRH).; 2007

El desarrollo y normal crecimiento del feto depende del adecuado transporte de nutrientes, metabolitos,  iones y agua a trav¨¦s de la placenta. Durante las primeras semanas el desarrollo placentario se realiza en un medio hip¨®xico. A medida que avanza la gestaci¨®n, la presi¨®n de ox¨ªgeno (PO2) aumenta. Este cambio en la PO2, es muy importante para el desarrollo placentario. En modelos de hipoxia, se produce un aumento del factor inducible por hipoxia tipo 1 alfa (HIF 1¦Á), un conocido factor de trascripci¨®n que media el incremento en la expresi¨®n de mol¨¦culas involucradas en la adaptaci¨®n a la hipoxia. Previamente informamos la expresi¨®n de acuagliceroporinas  (AQP3, AQP7, y AQP9) en placenta humana y demostramos que en condiciones patol¨®gicas como la preeclampsia existe una sobreexpresi¨®n de AQP9. Observamos tambi¨¦n que el ARNm de AQP9 aumenta despu¨¦s de la inducci¨®n del HIF-1¦Á, aunque el transporte de agua disminuye. En el presente trabajo investigamos si AQP9 est¨¢ regulado por HIF-1¦Á y si el sulfato de magnesio ampliamente utilizado en los cuadros agudos de preecl¨¢mpsia modifica la expresi¨®n del transportador. Para ello, explantos de placenta a t¨¦rmino sin trabajo de parto y sin complicaciones fueron cultivados durante 24 horas en: 1- medio (normoxia), 2- hipoxia qu¨ªmica obtenida por la incubaci¨®n con CoCl2 250 uM, inhibidor de la degradaci¨®n del HIF-1¦Á, 3- medio con MgSO4 (4mM) o 4- medio con CoCl2 + MgSO4. Posteriormente se analiz¨® la expresi¨®n de AQP9 por Western blot y se evalu¨® la funcionalidad de la prote¨ªna mediante incorporaci¨®n de agua tritiada en explantos tratados en las mismas condiciones. La viabilidad de los tejidos se determin¨® a trav¨¦s de la liberaci¨®n de b-hCG. En condiciones de hipoxia qu¨ªmica, observamos una disminuci¨®n de la expresi¨®n proteica de AQP9 que revierte frente al agregado MgSO4 (4mM). Los estudios funcionales revelaron una disminuci¨®n de la incorporaci¨®n de agua en explantos tratados con CoCl2 (250uM); mientras que la incorporaci¨®n de agua alcanza valores normales luego del tratamiento con MgSO4. Estos resultados sugieren que en condiciones de hipoxia, el MgSO4 contrarrestar¨ªa los efectos causados por la hipoxia, restableciendo no s¨®lo los niveles proteicos sino tambi¨¦n la funcionalidad de AQP9. Posteriores estudios ser¨¢n necesarios para determinar el rol de esta acuaporina en placenta humana. El estudio de los mecanismos que regulan la expresi¨®n de AQP9 podr¨¢ abrir nuevas hip¨®tesis que nos acerquen a conocer c¨®mo es el desarrollo de este desorden gestacional y as¨ª poder implementar una terapia adecuada que contribuya a mejorar el funcionamiento placentario para lograr una gestaci¨®n exitosa.