Monocapas lipídicas como técnicas para el estudio de la acción de fosfolipasas a nivel de membrana

MARIA L. FANANI; BRUNO MAGGIO

Estrategias y Avances en el Estudio de Toxinas de Interés para la Biomedicina

Red Iberoamericana CYTED-BIOTOX y Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

Lugar: Puebla; Año: 2015; p. 119 - 139

Las enzimas lipolíticas, tales como las fosfolipasas son parte esencial de varios venenos y cócteles bacterianos de toxinas. Su acción primaria se localiza mayormente en la membrana plasmática de las células. La comprensión del modo de acción y regulación de estas enzimas a nivel molecular se ha abordado en las últimas décadas utilizando, entre otros enfoques, a las monocapas lipídicas como modelo de biomembranas. Este sistema permite, además de la medida de la actividad catalítica, un control riguroso de los parámetros moleculares y estructurales de la membrana sometida al proceso lipolítico. Nos centraremos en la acción de la esfingomielinasa, que degrada esfingomielina produciendo ceramida. Este producto permanece en la membrana e induce la reorganización de la superficie llevando a profundos cambios de sus propiedades, tanto en el nivel molecular local como a largo alcance en la estructura de la interfaz. Este capítulo examinará los enfoques técnicos utilizados para el estudio de los cambios inducidos en la superficie de membrana e incluirá tanto la microscopía de fluorescencia como la de de ángulo de Brewster utilizando capas monomoleculares de tipo Langmuir y Langmuir-Scheafer.