Modificaciones en la composición fosfolipídica del sinciciotrofoblasto de placentas humana por hipoxia

LEVI LORENA; MARINO GABRIELA; CASTRO-PARODI MAURICIO; STERIN-SPEZIALE NORMA; DAMIANO ALICIA E

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; 20º Reunión Bienal de la Asociación Latinoamericana de Investigadores de Reproducción Humana; 2007

Asociación Latinoamericana de Investigadores de Reproducción Humana

La placenta humana es responsable del normal crecimiento y desarrollo del feto. Durante la implantación, las células de citotrofoblasto más internas se fusionan formando el sinciciotrofoblasto (STh). En placentas preeclámpticas, se observa una invasión trofoblástica anormal de las arterias espirales dando lugar a un tejido trofoblástico relativamente hipóxico. El descubrimiento del factor-inducible por hipoxia 1α (HIF-1α) ha podido dar respuesta a muchos de los cambios adaptativos que se observaban. HIF-1α es un activador transcripcional que media los cambios de expresión de varios genes en respuesta a la concentración celular de oxígeno.El proceso de diferenciación del citotrofoblasto a sinciciotrofoblasto va acompañado por cambios en la composición fosfolipídica de las membranas. Se demostró un aumento de fosfatidilserina en la cara externa del trofoblasto durante la diferenciación. Nuestro objetivo fue evaluar la composición fosfolipídica de vesículas aisladas de membranas basales y apicales de sinciciotrofoblasto de placentas normales a término en normoxia e hipoxia. Para ello se incubaron, durante 24 horas, explantos de placenta normales a término en normoxia, y con CoCl2 inhibidor de la degradación del HIF-1α generando una hipoxia química. Luego se obtuvieron vesículas de membranas apicales y basales por centrifugación diferencial, se extrajeron los fosfolípidos de membrana por el método de Bligh and Dyer, se separaron por cromatografía en capa delgada y se cuantificaron por el método de Fiske Subarrow. También se determinó el contenido de colesterol. La viabilidad de los explantos se corroboró mediante dopaje de beta-hCG. Cuando evaluamos la composición fosfolipídica del Sth de placentas a término, pudimos observar una polaridad en la distribución de los fosfolípidos de las membranas apical y basal. Ambas poseen un alto contenido de esfingomielina (31% membrana apical vs 22% membrana basal) y de colesterol, significativamente más alto en la membrana apical (6,2 ± 0,6 vs 3,6 ± 0,3 ug/mg de proteína;P