Secreción de agua en quistes renales in vitro de pacientes con poliquistosis renal

GODOY SEBASTIÁN L; DAMIANO ALICIA E; ZOTTA ELSA; FRAGA, A; AZURMENDI, PABLO; MARTÍN, R; IBARRA CRISTINA

Tafí del Valle

Congreso; Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2001

SAB

La acumulación de fluído en los quistes de pacientes con enfermedad poliquística renal autosómica dominante (PQRAD) resulta del transporte de solutos y agua desde el intersticio hacia el interior de la cavidad quística. Con el objetivo de caracterizar mejor los mecanismos de transporte que median esta secreción medimos el movimiento neto de agua transepitelial (Jw) de quistes disecados de riñones poliquísticos humanos. Cada quiste se montó en una cámara de Ussing y se bañó de ambos lados con solución Ringer (Na+=139 mEq/l, Cl-= 123 mEq/l). El movimiento de agua fue secretor (Jw = -0,08 ± 0,01 l/min.cm2) durante los primeros 10 min haciéndose absortivo paulatinamente. La corriente de cortocircuito (Isc) medida simultáneamente aumento de 1,7 A/cm2 a 5,7 A/cm2 en los primeros 10 min para luego decaer hasta el valor inicial. El reemplazo de solución Ringer por líquido natural de quiste (Na+=136 mEq/l, Cl-= 99 mEq/l) produjo un aumento significativo de la secreción de agua (Jw = -0,56 ± 0,01 l/min.cm2) y un concomitante aumento de Isc hasta valores de 10 A/cm2. La diferencia de potencial eléctrico transepitelial se mantuvo constante durante todo el experimento (2-3 mV lumen negativo). El gen de la policistina 2 (PKD2) fue evidenciado en el ARN de quiste por RT-PCR usando oligonucleotidos ?primers? que flanquean zonas altamente conservadas. Estudios de western blots usando proteínas de quiste y de líquido de quiste mostró la expresión de la proteína policistina-2. Por estudios de inmunohistoquímica se observó además la presencia de AQP7 y CFTR en la membrana apical de los quistes. Este último fue también detectado en la membrana basolateral. La presencia de estos transportadores podrían estar implicados en el movimiento del fluído hacia la cavidad del quiste. El hecho que el líquido de quiste produzca una estimulación de la secreción confirmaría observaciones previas obtenidas por Grantham y col. (J. Am. Soc. Nephrol. 1995, 6: 1242) sobre la presencia de un lípido que actuaría como un potente modulador endógeno para la secreción de fluído al interior del quiste.