Expresión de canales iónicos y no iónicos en sinciciotrofoblasto de placenta humana a término

DAMIANO, ALICIA E; GONZÁLEZ PERRET , SILVIA; CARATINO, MARCELO; CANTIELLO, HORACIO; KOTSIAS BASILIO; IBARRA CRISTINA

Mar del Plata

Congreso; Reunion anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 1999

El sinciciotrofoblasto de placenta humana a término carece de uniones estrechas y el transporte de metabolitos, iones, y agua entre la sangre materna y fetal se realiza exclusivamente por la vía transcelular. Nuestro propósito es comenzar a identificar los canales iónicos y no iónicos implicados en la función de transporte. Para ello se purificó el ARN total, y mediante la técnica de RT-PCR usando primers que flanquean zonas de nucleótidos altamente conservadas se amplificaron secuencias que codifican para el regulador del transporte de la fibrosis quística (CFTR) y para canales de agua (AQPs). Los productos de amplificación se analizaron por electroforesis horizontal en geles de agarosa y los resultados obtenidos muestran que en sinciciotrofoblasto se expresa una banda esperada de ~ 295 bp correspondiente al exon 13 del CFTR y otra banda de ~ 400 bp correspondiente a la zona NPA-NPA de las AQPs. Los estudios de Western blot se realizaron sobre una fracción de membranas apicales de sinciciotrofoblasto utilizando dos anticuerpos monoclonales específicos para el CFTR humano, uno dirigido contra el dominio R y el otro contra el dominio C-terminal. En ambos casos se detectó una banda de ~170 kDa, que corresponde a la forma glicosilada de la proteína completa informada en otros tejidos humanos. En la misma preparación se observó una importante banda de ~160 kDa usando un anticuerpo policlonal dirigido contra un fragmento de la proteína apical de células epiteliales de túbulo renal de Xenopus laevis (Apx), la cual se informó que estaba asociada a un canal de sodio sensible a amiloride. Resta dilucidar la importancia fisiológica de la presencia de canales de Cl-, Na+ y agua identificados por biología molecular en el sinciciotrofoblasto de placenta humana a término.