TAUROURSODESOXICOLATO (TUDC) INHIBE LA ACTIVACIÓN DE LAS VÍAS DE SEÑALIZACIÓN PROCOLESTASICAS PKCC Y PI3K/AKT EN LA COLESTASIS POR ESTRADIOL 17 beta D-GLUCURÓNIDO (E)

BOAGLIO, ANDREA C; MISZCZUK, GISEL SABRINA; BAROSSO, ISMAEL R.; TOLEDO, FLAVIA D.; CROCENZI, FERNANDO A.; ROMA, MARCELO G

Mar del Plata

Congreso; Reunión Anual Conjunta SAIC/SAFIS/SAFE; 2013

SAIC/SAFIS/SAFE

E altera función y localización de Mrp2 y Bsep, transportadoresclaves para la formación de bilis, activando las vías dependientesde proteínas quinasas C clásica (PKCc) y de fosfatidilinositol 3quinasa (PI3K/Akt). La colestasis gravídica, patología asociada aniveles altos de E, es tratada con ursodesoxicolato, cuyo principalmetabolito activo es TUDC. Dado que los mecanismos molecularesde acción de TUDC en la colestasis por E no han sido indagados,evaluamos si TUDC puede prevenir esta patología inhibiendola activación de PKCc y PI3K/Akt. Determinamos por Western Blot,en hepatocitos de rata, la activación de PKCc (% de translocacióna membrana) y de Akt (% de forma fosforilada). E activó PKCcy Akt. El pretratamiento con TUDC (50 y 100 µM) seguido deexposición a E (200 µM) previno la activación de PKCc (-35±5%y -34±4%) y de Akt (-39±3% y -37±2%), p<0.05 vs. E. Evaluamosfunción canalicular en duplas de hepatocitos de rata cuantificandoacumulación canalicular (AC) de sustratos fluorescentes de Bsepy Mrp2 por análisis de imágenes. E (200 µM) disminuyó un 59±2%la AC de cGAMF, sustrato de Bsep (p<0.05 vs. control), mientrasque TUDC (50 y 100 µM) previno parcialmente estas alteraciones:+61±7% y +72±6%, p<0.05 vs. E. Las variaciones en la AC deGS-MF, sustrato de Mrp2, fueron similares a las de cGAMF. Lasalteraciones por E fueron prevenidas por TUDC en el modelo dehígado aislado y perfundido de rata. E (2 μmol/híg) redujo el flujobiliar (-59±14%, p<0.001). TUDC (50 µM) previno parcialmente lacaída del flujo por E (+127±12%, p<0.001), mientras que TUDC100 µM la previno completamente. Datos similares se obtuvieron almedir velocidad de excreción de TC y DNP-GS, sustratos respectivosde Bsep y Mrp2. La inmunohistoquímica reveló que E indujoendocitosis de Bsep y Mrp2, y que el pretratamiento con TUDCprevino este fenómeno. Concluimos que TUDC restablece funcióny localización de Bsep y Mrp2 alteradas por E, impidiendola activación de PKCc y PI3K/Akt.