EVALUACIÓN DE LA PARTICIPACIÓN DEL RECEPTOR DEL FACTOR DE CRECIMIENTO EPIDÉRMICO (EGFR) EN LAS ALTERACIONES COLESTÁSICAS INDUCIDAS POR ESTRADIOL-17ß-D-GLUCURÓNIDO (E17G) EN DUPLAS AISLADAS DE HEPATOCITOS DE RATA (DAHR)

BAROSSO, ISMAEL R.; ZUCCHETTI, ANDRÉS ERNESTO; MISZCZUK, GISEL SABRINA; TABORDA, DIEGO; CROCENZI, FERNANDO A.; SÁNCHEZ POZZI, ENRIQUE J

Mar del Plata

Congreso; Reunión Anual Conjunta SAIC/SAFIS/SAFE; 2013

SAIC/SAFIS/SAFE

Previamente, demostramos que el Receptor de Estrógenos α(REα) participa junto con PKCα de una vía de señalización activadapor E17G que lleva a la internalización de los transportadorescanaliculares Bsep y Mrp2. En vista que EGFR es activado porestradiol no conjugado cascada debajo de REα, el objetivo deeste trabajo fue evaluar la participación y el potencial papel delEGFR en la alteración colestásica inducida por E17G. La participaciónde EGFR en las alteraciones colestásicas inducidas porE17G se evaluó en DAHR utilizando dos inhibidores específicosdiferentes: Tirfostina AG1478 (Tyr) y Cl7387785 (CL). Las duplasfueron pre-tratadas con ICI182,780 (ICI, 1µM), Tyr (150nM) o CL(1µM) durante 15 min y luego fueron tratadas con E17G (100µM)por 20 min. Además, algunos preparados de DAHR fueron coincubadoscon Tyr o Cl junto con ICI durante 15 min previo a laexposición a E17G. Finalmente, se expusieron a colilglisilamidofluoresceína (CGamF, sustrato de Bsep) o clorometilfluoresceínadiacetato (GS-MF, sustrato de Mrp2) para estudiar la actividadde Bsep y Mrp2. Por microscopía de fluorescencia se determinóel porcentaje de DAHR que acumularon CGamF (AVc CGamF) oGS-MF (AVc GS-MF) en sus vacuolas canaliculares. Resultados(% del Control) se expresan como media±ES: Ambos inhibidoresprevinieron parcialmente la disminución de AVc de CGamF(E17G+Tyr: 80±8%*, E17G+CL: 74±6%*) y GS-MF (E17G+Tyr:73±4%*, E17G+CL: 74±10%*) inducida por E17G (AVc CGamF:54±2%^; AVc GS-MF: 56±2%^). No se observó un efecto aditivo dela prevención cuando las DAHR se coincubaron con ICI (AVc CGamF:E17G+ICI: 74±5%*, E17G+ICI+Tyr: 82±9%*, E17G+ICI+CL:68±7%*; AVc GS-MF: E17G+ICI: 70±4%*, E17G+ICI+Tyr: 73±3%*,E17G+ICI+CL: 73±11%*). ^Significativamente diferente de Control(p<0.05), *Significativamente diferente del Control y E17G(p<0.05). Conclusión: El EGFR participaría en las alteraciones colestásicas producidas por E17G por un mecanismo dependientede la vía PKCα/REα.