FOSFATIDILINOSITOL 3-QUINASA (PI3K) PARTICICIPA EN LA COLESTASIS POR ESTRADIOL 17ß-GLUCURÓNIDO (E217G): ROL DE AKT Y COOPERATIVIDAD CON PROTEÍNA QUINASA C DEPENDIENTE DE Ca2+ (PKCc).

BOAGLIO, ANDREA C; ZUCCHETTI, ANDRÉS ERNESTO; SÁNCHEZ POZZI, ENRIQUE J; MOTTINO, ALDO D; CROCENZI, FERNANDO A.; ROMA, MARCELO G

Mar del Plata, ARGENTINA

Congreso; LIV Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

E217G induce colestasis aguda y reversible, produciendo endocitosis de los transportadores canaliculares Bsep y Mrp2 vía activación de PKCc y PI3K. En este trabajo, indagamos en duplas aisladas de hepatocitos de rata (DAHR) si el efector cascada abajo de PI3K, Akt está involucrado y si las vías PI3K y PKCc actúan cooperativamente. La inhibición farmacológica de Akt previno la disminución por E217G en la acumulación apical de CLF y GSMF, sustratos fluorescentes de Bsep y Mrp2. El inhibidor de PI3K wortmanina (WM) y el de PKCc (Go6976) previnieron aditivamente alteraciones en la acumulación de CLF y GS-MF, así como la endocitosis de los transportadores Bsep y Mrp2, indicando existencia de dos mecanismos de acción diferentes, uno probablemente endocitando transportadores (PKCc) y otro impidiendo sureinserción (PI3K). Para confirmar esta presunción, y dado que la reinserción pero no la endocitosis depende de microtúbulos, evaluamos la participación diferencial de los mismos en la prevención provista por Go6976 y WM. Colchicina (desorganizador de microtúbulos) impidió que WM previniera la disminución de la acumulación canalicular de CLF y GS-MF inducida por E217G, mientras que no afectó la capacidad de Go6976 para prevenir estas alteraciones, un hallazgo confirmado por inmunolocalización de Bsep y Mrp2. En el modelo de hígado aislado y perfundido de rata, Go6976 previno la disminución inicial del flujo biliar y de laexcreción de glutation (sustrato de Mrp2) y de [3H]-taurocolato (sustrato de Bsep) inducida por E217G, un proceso que refleja endocitosis de transportadores. WM, en cambio, aceleró la recuperación de la función secretora de esos transportadores a la normalidad, indicativo de una acelerada reinserción de Bsep y Mrp2. Concluimos que la colestasis por E217G involucra la acción cooperativa de las vías de señalización PI3K-Akt y PKCc, promoviendo internalización de transportadores canaliculares (PKCc) y su posterior retención intracelular (PI3K).